急性白血病患者骨髓细胞中WT1基因的表达 .pdf

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急性白血病患者骨髓细胞中WT1基因的表达

李骏;孟宇;耿英华;李佳佳;周黎黎;杨艳丽

【摘要】目的:探讨急性白血病(AL)患者骨髓细胞WT1基因的表达.方法:采用实时

荧光定量PCR(RQ-PCR)检测100例AL患者骨髓细胞WT1基因及内参基因(ABL),

以WT1基因拷贝数/内参基因拷贝数(NQ比值)计算基因表达水平.结果:初诊组和

复发组AL患者WT1表达水平明显高于完全缓解组(P0.01).初诊患者中,AL各亚

型之间WT1表达水平差异均有统计学意义(P0.01),急性淋巴细胞白血病WT1表

达水平最低,急性早幼粒细胞白血病表达最高.随访3例患者,达到完全缓解时WT1

表达很低,复发时WT1表达均再次升高.结论:WT1基因在AL中的表达,可作为白血

病疗效评价及监测微小残留病灶的指标.

【期刊名称】《蚌埠医学院学报》

【年(卷),期】2013(038)007

【总页数】3页(P794-796)

【关键词】白血病;WT1基因;微小残留病;实时荧光定量聚合酶链反应

【作者】李骏;孟宇;耿英华;李佳佳;周黎黎;杨艳丽

【作者单位】蚌埠医学院第一附属医院,血液科,安徽,蚌埠,233004;蚌埠医学院第一

附属医院,血液科,安徽,蚌埠,233004;蚌埠医学院第一附属医院,血液科,安徽,蚌

埠,233004;蚌埠医学院第一附属医院,血液科,安徽,蚌埠,233004;蚌埠医学院第一附

属医院,血液科,安徽,蚌埠,233004;蚌埠医学院第一附属医院,血液科,安徽,蚌

埠,233004

【正文语种】中文

【中图分类】R733.71

WT1基因(Wilmstumor1gene)于1990年由从Wilms瘤细胞中分离出来,该

基因位于人类染色体11p13,相对分子质量约50000,编码产物为转录因子,作

为抑癌基因调控细胞生长,与Wilms肿瘤发生、发展密切相关[1]。WT1基因

主要在胚胎发生过程中表达,对泌尿生殖系统的发育起重要作用,WT1基因仅在

成人肾脏、脾脏、睾丸、乳腺、卵巢、子宫内膜及正常造血祖细胞中有少量表达

[2]。作为“泛白血病标志”(panleukemicmarker)的WT1也在急性白血病

(AL)患者骨髓中表达,对白血病细胞增殖、分化起重要作用,与白血病的发生、发

展及预后有关[3]。为进一步明确WT1的表达水平,我们采用实时荧光定量

PCR(RQ-PCR)对100例急性白血病(AL)骨髓的WT1基因进行检测。

1资料与方法

1.1一般资料收集我院2011年1月至2011年8月收治的AL患者共100例,分

为3组。初发组60例,男35例,女25例;年龄4~80岁;其中,急性淋巴细胞

白血病(ALL)13例,急性粒细胞白血病未分化型(M1)1例,急性粒细胞白血病部分

分化型(M2)13例,急性早幼粒细胞白血病(M3)9例,急性粒-单核细胞白血病

(M4)6例,急性单核细胞白血病(M5)8例,急性红白血病(M6)1例,急性非淋巴

细胞白血病(AML)未分型7例,急性白血病(AL)未分型2例。完全缓解组34例,

男16例,女18例。复发组6例,男、女各3例。100例患者均经骨髓细胞合学

国、内白现血行病白免血疫病表型分和型染标色准体[4]、。融治合疗基方因案

检:测初,符发AML(除M3外)使用DA(米托蒽醌/吡柔比星+阿糖胞苷)方案;初发

M3用全反式维A酸(ATRA)+亚砷酸(ATO)联合蒽环类药物;初发ALL使用VDLP

方案化疗4周。

1.2骨髓白细胞的提取常规抽取患者骨髓2~7ml,乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝,

用红细胞裂解液(NH4Cl+NaHCO3+EDTA·Na2加蒸馏水再用标准酸碱调至pH

7.4)将红细胞裂解、洗涤、离心2~3次,取得白细胞后,大部分用细胞悬浮液留

存于-80℃冰箱备用,取少量用TRIZOL反复吹打至完全溶解,-20℃冻存。

1.3RNA提取将以上TRIZOL溶解

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