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山西农业科学2023，51（12）：1435-1441JournalofShanxiAgriculturalSciences
doidoi:10.3969/j.issn.1002-2481.2023.12.12
HIF-1α纳米抗体的制备及其抑制黑素瘤生长的作用
111121
李佳敏，贾琼，秦蓉芬，迟志端，王富明，范瑞文
（1.山西农业大学动物医学学院，山西太谷030801；2.晋中市庄子乡综合便民服务中心，山西晋中030600）
摘要缺氧诱导因子1α（Hypoxiainduciblefactor1α，HIF-1α）参与低氧微环境相关疾病的发生等过程，具有控
：
制肿瘤生长和发展的功能。黑色素瘤是一种发生于人和动物恶性程度较高的肿瘤。为探明HIF-1α纳米抗体对
黑色素瘤的影响，研究利用前期保存的羊驼源黑色素瘤细胞噬菌体文库筛选HIF-1α纳米抗体，经原核表达与纯
化后，通过WesternBlot和免疫组织化学验证HIF-1α纳米抗体与抗原的结合性；分别通过CCK-8法、划痕试验
以及WesternBlot法检测其对B16黑素瘤细胞的增殖和迁移能力及其相关分子表达的影响。结果表明，经表达
和纯化获得的HIF-1α纳米抗体分子质量约为16ku，没有跨膜结构，具有亲水性。通过WesternBlot和免疫组织
化学验证了其具有良好的抗原结合性。在增殖试验和划痕试验中，与对照组相比，HIF-1α纳米抗体抑制了B16
细胞的增殖和迁移，下调了靶基因VEGF的表达，并使细胞增殖和迁移相关蛋白Ras、ERK、RAC和RAF的表达
量下调。预测HIF-1α纳米抗体进入B16细胞内，与抗原结合，通过下游靶基因VEGF下调RAs、ERK、RAC、
RAF的表达，从而对细胞增殖和迁移起抑制作用，可作为黑色素瘤治疗的新靶点。
关键词HIF-1α；纳米抗体；B16细胞；WesternBlot法；CCK-8法；细胞增殖；细胞迁移
：
中图分类号R739.5文献标识码A文章编号1002‒2481（2023）12‒1435‒07
：：：
EffectonPreparationofHIF-1αNano-AntibodyandIts
InhibitionofMelanomaGrowth
LIJiamin
111121
，JIAQiong，QINRongfen，CHIZhiduan，WANGFuming，FANRuiwen
（
1.CollegeofVeterinaryMedicine，ShanxiAgriculturalUniversity，Taigu030801，China；
2.JinzhongCityZhuangziIntegratedConvenientServiceCenter，Jinzhong030600，China）
Abstract：Thehypoxia
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