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JNK信号通路抑制剂体内应用方法研究

陈新宇1，杨浩2，蔡虎志2，卢青1，陈青扬2，陈毅君2

【摘要】【摘要】目的探讨JNK信号通路抑制剂(SP600125)体内长期实验的

应用方法。方法将40只新西兰兔随机分为八组：空白对照组、模型对照组、

JNK高剂量组、JNK低剂量组、JNK空白组、DMSO模型组、DMSO空白组、

阳性对照组。自实验第一天开始各组给予相应处理，连续4周。4周末检测实

验兔心肌组织JNK总蛋白及蛋白磷酸化和基因表达水平。结果经阿霉素干预

后，各组实验组心肌P-JNK表达均不同程度上调，其中以模型对照组、DMSO

模型组上调最为明显(P＜0.05)。JNK低、高剂量组和阳性对照组心肌P-JNK

表达水平上调较模型对照组缓慢(P＜0.05)，其中以JNK高剂组心肌P-JNK水

平上调最为缓慢(P＜0.05)。各实验组间JNK总蛋白、JNKmRNA表达差异无

统计学意义(P＞0.05)。结论连续4周小剂量皮下注射JNK信号通路抑制剂可

以显著下调p-JNK的表达，该方法能够为体内长期实验研究提供思路。

【期刊名称】海南医学

【年(卷),期】2015(000)008

【总页数】4

【关键词】【关键词】JNK信号通路；抑制剂；DMSO；体内应用

JNK信号传导通路是MAPK信号通路家族成员之一，它是广泛存在哺乳动物细

胞内的一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，是细胞外界信号从细胞表面转导到细胞核

内部的重要传递者，在众多的疾病进展过程中起着重要的作用。国内外学者已

经较深透的探究了该信号通路，在对于该信号通路的研究过程中，抑制剂的应

用是最常见的研究思路。

JNK信号通路抑制剂(SP600125)是丝/苏氨酸激酶广谱抑制剂，有效抑制c-

Jun氨基末端激酶(JNK)，其体外实验和体内短期实验已较为成熟，但体内长期

实验如何应用SP600125来干预JNK的通路蛋白则罕有报道。本实验旨在探索

长期体内应用JNK信号通路抑制剂(SP600125)的方法，为相关研究提供理论

基础。

1材料与方法

1.1实验材料

1.1.1动物健康普通级雄性新西兰兔40只，质量(1.85±0.11)kg，由长沙市天

勤生物技术有限公司提供。动物许可证批号：SCXK(湘)2009-0012。在自由饮

食、光/暗周期为12h/12h(光照时间为6:00～18:00)、背景噪音为

(40±10)dB、温度(20±3)℃条件下饲养1周以适应环境。

1.1.2主要药物与试剂(1)阿霉素：深圳万乐药业有限公司生产(；

(2)乌拉坦：山东齐鲁兴华制药有限公司(；(3)生理盐水：湖南科

伦制药有限公司(；(4)依那普利：江苏扬子江药业(；

(5)JNK抑制剂：美国SELLECK公司；(6)P-JNK抗体：美国SantaCruz公司

(sc-12882)；(7)JNK抗体：美国SantaCruz公司(sc-572)；(8)DMSO：美国

SELLECK公司。

1.2方法

1.2.1分组采用完全随机分组设计，将40只实验兔按体重从小到大排列，用记

号笔在右耳内侧进行编号，查随机数字表，将实验兔随机分为8组，分别为：

空白对照组、模型对照组、JNK高剂量组、JNK低剂量组、JNK空白组、

DMSO模型组、DMSO空白组、阳性对照组，每组实验兔5只。

1.2.2JNK病理模型表达诱导参照文献[1-2]，将注射用盐酸阿霉素用生理盐水

稀释成1.0mg/ml溶液，模型对照组、JNK高剂量组、JNK低剂量组、

DMSO模型组、阳性对照组耳缘静脉注射，每次1.0ml/kg，每周2次，连续

4周。同时，空白对照组、JNK空白组、DMSO空白组中实验兔耳缘静脉注入

0.9%生理盐水1ml/kg。

1.2.3给药方法将JNK抑制剂SP600125用DMSO