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TBX1基因可能通过调控Tgfb2基因的表达参与心脏发育及
先天性心脏病的发生
程菲;姜红堃
【摘要】目的通过检测TBX1基因干扰后转化生长因子β2基因(Tgfb2)表达的变
化探讨TBX1基因参与心脏发育及先天性心脏病发生的可能途径.方法根据处理因
素不同,将细胞分为NC-siRNA组和TBX1-siRNA组.在大鼠胚胎心肌细胞H9C2
中转染TBX1-siRNA,采用实时定量PCR法(qRT-PCR)检测干扰效率;收集转染
TBX1-siRNA48h后的H9C2细胞系,提取总RNA,qRT-PCR法检测干扰后Tgfb2
基因mRNA的表达水平.结果(1)qRT-PCR检测心肌细胞TBX1mRNA的表
达:H9C2细胞转染TBX1-siRNA48h后为0.22±0.02,与NC-siRNA(0.99±0.02)
比较,TBX1mRNA表达显著下调,差异有统计学意义(P<0.05).(2)qRT-PCR检测
心肌细胞Tgfb2mRNA的表达:H9C2细胞转染TBX1-siRNA48h后为
2.19±0.01,与NC-siRNA(1.00±0.01)比较,Tgfb2mRNA表达明显上调,差异有统
计学意义(P<0.05).结论TBX1基因表达下调可能通过调控Tgfb2基因的表达参与
心脏发育及先天性心脏病的发生.
【期刊名称】《中国中西医结合儿科学》
【年(卷),期】2018(010)001
【总页数】4页(P36-39)
【关键词】先天性心脏病;TBX1基因;Tgfb2基因;心脏发育;儿童
【作者】程菲;姜红堃
【作者单位】110001沈阳,中国医科大学附属第一医院儿科;110001沈阳,中国医
科大学附属第一医院儿科
【正文语种】中文
【中图分类】R725.4
先天性心脏病是最常见的出生缺陷,为婴幼儿非感染性死亡的首要原因,占主要先
天发育畸形的1/3[1]。心脏的形成过程十分复杂,由遗传和环境因素共同作用引
起,遗传率达55%~65%。胚胎心脏发育过程中的任何紊乱均可导致先天性心脏
病的发生。人类TBX1基因定位于22q11.21,为染色体22q11.2微缺失中关键基
因[2-3],参与心脏、耳、甲状腺,尤其是肺动脉干基部心肌的发育[2,4]。该基因
主要表达于第二心区,且以剂量依赖效应的方式调节心脏流出道的发育,单倍剂量
不足是引起22q11.2微缺失综合征患者心脏发育缺陷的重要原因[3]。转化生长因
子β2基因(transforminggrowthfactorbeta2,Tgfb2)是高度保守的TGFp超
家族成员之一,具多种生物学作用。RXRA基因敲除小鼠中Tgfb2基因表达升高,
心肌细胞凋亡增加,从而导致胚胎心脏流出道发育异常,推测Tgfb2基因可能是
圆锥动脉干畸形的致病易感基因[5]。课题组前期研究发现,大鼠胚胎心肌细胞系
TBX1基因干扰后,差异表达芯片预测结果提示Tgfb2基因表达增高。为进一步明
确二者之间的关系,本研究拟将TBX1-siRNA转染至大鼠胚胎心肌细胞系H9C2
中,检测干扰后Tgfb2基因mRNA的表达水平,以期探讨二者之间的关系及在心
脏发育及先天性心脏病发病中的作用。
1材料及方法
1.1主要试剂及材料大鼠胚胎心肌细胞H9C2购自中国科学院细胞库;胎牛血清
和DMEM购自Gibco;Trizol试剂购自美国Invitrogen公司;反转录试剂盒购
自大连保生物有限责任公司;SYBRGreenPCRMastermix购自美国Applied
Biosystems公司。
1.2细胞培养与分组大鼠胚胎心肌细胞系H9C2常规在DMEM高糖培养基(10%
胎牛血清,100U/mL青霉素,100mg/L链霉素)中,37℃、5%CO2及饱和湿
度的条件下培养。0.25%的胰
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