RNA干扰建立MMP-9基因稳定沉默的胃癌细胞株BGC823的开题报告.pdfVIP

RNA干扰建立MMP-9基因稳定沉默的胃癌细胞株

BGC823的开题报告

一、研究背景

胃癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，发病率和死亡率均较高。MMP-9是一种重要的

基质金属蛋白酶，能够参与肿瘤细胞的侵袭和转移，与胃癌的发生和发展密切相关。

然而，目前尚无有效的方法能够有效地控制MMP-9的表达和活性。RNA干扰技术是一

种利用RNA分子特异性靶向降解靶基因mRNA的方法，能够实现基因沉默，并被广泛

应用于细胞和动物模型研究中。本研究旨在利用RNA干扰技术建立MMP-9基因稳定

沉默的胃癌细胞株，为胃癌的治疗提供新的思路和方法。

二、研究内容

1.构建MMP-9基因沉默的shRNA质粒：

通过生物信息学分析，设计合适的MMP-9shRNA序列，并构建到质粒中。鉴定合成的

质粒，确定其正确性和完整性。

2.转染胃癌细胞株BGC823：

将MMP-9shRNA质粒转染到BGC823细胞株中，并筛选出转染效率高且基因沉默稳定

的细胞株。

3.验证MMP-9基因沉默的效果：

利用实时荧光定量PCR和Westernblot技术验证MMP-9的基因和蛋白表达是否被沉

默。同时检测细胞增殖、侵袭和迁移能力的变化，验证MMP-9基因沉默对BGC823细

胞株的影响。

三、研究意义

MMP-9是胃癌侵袭和转移的关键分子，与胃癌发生和发展密切相关。建立MMP-9基因

稳定沉默的胃癌细胞株可以有效地抑制MMP-9的表达和活性，从而阻止癌细胞的侵袭

和转移。该研究为胃癌的治疗提供新的思路和方法，并为探究MMP-9的功能和在肿瘤

发生和发展中的作用提供重要的实验基础。