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TRPM7与乳腺肿瘤

摘要：肿瘤是一种临床上常见、高发、难早诊断、难治愈、严重危害人类生命

和健康的慢性疾病，现已成为全球重大的公共卫生问题。中国女性肿瘤发病第1

位的是乳腺癌，转移性乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，全年约有120万妇女

发生乳腺癌，其中有一半左右的患者在10年内死亡，国内转移性乳腺癌的发病

率呈现递增的趋势，己成为部分城市妇女中占首位的恶性肿瘤，而且发病年龄越

来越趋向于年轻化。本文试图通过免疫组实验来探究TRPM7与乳腺肿瘤之间的关

系，为乳腺癌早期诊断、治疗评价及判断预后提供参考。

关键词：TRPM7；乳腺肿瘤；免疫组织化学

1材料与方法

1.1标本

乳腺癌旁组织及癌组织标本取自某某医院手术室，其来源为4例女性患者，

年龄范围为25~56岁。30例标本均来自患者术前未接受化学治疗、放射治疗。每

组配对的乳腺癌旁组织及癌组织标本来源于同一女性患者。

1.2免疫组织化学实验原理

链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结（SP）法，运用免疫基本原理即利用抗

原和一抗抗体特异性结合，然后利用一抗与标记生物素、突光素等的二抗进行反

应，再用标记辣根过氧化物酶（HRP）或碱性憐酸酶（AKP）等抗生物素（如链霉

亲和素等）结合，最后通过呈色反应来显示组织中成分，来达到对待测抗原的定

位、定性及半定量研究的目的。阴性对照组以PBS代替一抗。

1.3组织病理学检验

切除的标本立即使用10%中性福尔马林缓冲液固定；固定的标本依次经过75%

乙醇、85%乙醇、95%乙醇、无水乙醇脱水后用石腊包埋成錯块；使用10%多聚

赖氨酸浸泡处理载玻片然后后自然风干备用；包埋好的蜡块标本使用切片机制成

4um匀厚的组织切片；切好的切片放在恒温烤箱中烤片；烤片后放入二甲基苯中

脱錯x2次，每次l0min；脱錯后依次用无水乙醇、95%乙醇、85%乙醇、75%乙醇

水化；最后使用HE染色方法染色后，在光学显微镜下观察其病理特征。

1.4免疫组织化学实验

使用Elivision工具包，用Elivision标准方法进行免疫组织化学染色。TRPM7

抗体（一抗）用0.01M磷酸盐缓冲液（PBS）以1：100的比例稀释后滴加到经过

处理的切片上。阴性对照组使用0.01MPBS替代以排除非特异性反应引起的假阳

性。以阻断肽吸收实验来检测TRPM7抗体的特异性。

1.5统计分析

本实验采用SPSS19.0统计分析软件，对TRPM7分子的表达用卡方检验及

Fisher’确切概S率法进行检验分析。当P0.05时，认为差异显著，有统计学意义。

2结果

免疫组织化学染色显示TRPM7主要表达于乳腺肿瘤细胞的胞浆并且在所收集

标本的癌组织和相应癌旁组织中均有不同程度的表达。TRPM7在30例细胞组织

中，高表达者20例（66.7%），低表达或无表达者10例（33.3%）。相应的癌旁

组织中高表达者14例（46.7%），低表达或无表达者16例（53.3%），在乳腺肿

瘤组织与癌旁组织TRPM7的高表达差异（P=0.0110.05）有统计学意义。

表1免疫组织化学实验中TRPM7分子在不同标本中的表达情况

3讨论

TRPM7是TRPM超家族成员之一。TRPM7基因位于哺乳动物的第15号染色体上，包含

39个外显子。TRPM7亚基包含1863个氨基酸残基，分子量为212kDa。TRPM7通道对单价和

二价阳离子等具有大小不等通透性。TRPM7的通透性可以被体内外多种因素如细胞内Mg2+、

PH等所调控。因此，TRPM7不仅是阳离子通道，它还具有蛋白激酶功能。可通过激活其下

游的膜联蛋白-Ⅰ，肌动蛋白-Ⅱ和钙蛋白酶来参与抗炎反应、细胞的生长、收缩以及凋亡等。

TRPM7广泛表达于多种哺乳动物心、肝、肾、肺、脑等多种器官和组织中，参与机体多种生

理病理过程，例如机体Mg2+的体内平衡、交感神经元递质的释放、心肌的自律性、胃肠道

的运动、脂肪肝与肝纤维化、缺血缺氧神经元的坏死、高血压等。随着对TRPM7蛋白研究的

深入，其与肿瘤之间的关系越来越受到人们的关注。例如有文献报导TRPM7对多种肿瘤细胞

的增殖都是必须的，其中包括白血病、眼癌、胰腺癌乳腺癌、胃癌、头颈部麟状上皮细胞癌

等。

TRPM7蛋白作为哺乳动物最有代表