冬凌草甲素逆转硫代乙酰胺对破骨和成骨细胞分化的机制研究 .pdfVIP

·1892·doi10.12122/j.issn.1673-4254.2023.11.09JSouthMedUniv,2023,43(11):1892-1900

冬凌草甲素逆转硫代乙酰胺对破骨和成骨细胞分化的机制研究

金晓丽，许嘉，陈煊威，陈瑾，黄慧，张婷，任军，许健

浙江中医药大学医学技术与信息工程学院，浙江杭州310053

摘要：目的探究冬凌草甲素（ORI）和硫代乙酰胺（TAA）对破骨分化和成骨分化的作用及其机制。方法CCK-8检测TAA和

ORI对RAW264.7和骨髓间充质干细胞（BMSCs）增殖活力的影响；TRAP染色和免疫荧光染色检测TAA和ORI对RAW264.7

破骨分化的影响；Westernblot检测TAA和ORI对破骨特异性蛋白表达的影响；免疫荧光和流式细胞术检测TAA和ORI对p65

核易位和活性氧生成的影响；碱性磷酸酶和茜素红染色检测TAA和ORI对BMSCs成骨分化的影响；Westernblot法检测TAA

和ORI对BMSCs成骨和凋亡相关蛋白表达的影响。结果破骨诱导分化实验中，与TAA组相比，TAA+ORI组破骨细胞生成减

少（P0.01），MAPK/NF-κB通路明显被抑制（P0.01），p65核易位水平显著降低，细胞内活性氧生成减少（P0.01）。此外，与对

照组相比，TAA能够抑制BMSCsALP活性和钙化结节形成（P0.01），并且诱导BMSCs凋亡。与TAA组相比，TAA+ORI组

BMP-2/RUNX2表达增加，ALP活性增强（P0.01），钙盐结节形成增加（P0.01），细胞凋亡水平降低。结论ORI可以调控

MAPK/NF-κB预防TAA诱导的破骨分化，并且调控BMP-2/RUNX2缓解TAA抑制的骨形成。

关键词：冬凌草甲素；硫代乙酰胺；破骨分化；成骨分化；骨质疏松

Oridoninsuppressestheeffectofthioacetamideforpromotingosteoclastdifferentiation

ofRAW264.7cellsandinhibitingosteoblastdifferentiationofbonemesenchymalstem

cells

JINXiaoli,XUJia,CHENXuanwei,CHENJin,HUANGHui,ZHANGTing,RENJun,XUJian

SchoolofMedicalTechnologyandInformationEngineering,ZhejiangChineseMedicalUniversity,Hangzhou310053,China

Abstract:ObjectiveToexploretheeffectoforidonin(ORI)forsuppressingthioacetamide(TAA)-inducedosteoclast

differentiationofRAW264.7cellsandantagonizingtheinhibitoryeffectofTAAonosteogenicdifferentiationofbone

mesenchymalstemcells(BMSCs).MethodsTheeffectsofTAAandORIontheproliferationofRAW264.7cellsandSDrat

BMSCswereexaminedusingCCK-8assay.TRAPstainingandimmunofluorescencestainingwereusedtoobservetheeffects

ofTAAandORIonosteoclastdifferentiationinRAW264.7cells.Theexpressionsofosteoclast-specificproteinsinthetreated