紫外可见分光光度法 .pdfVIP

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紫外可见分光光度法——光的吸收定律

一.Lambert-Beer定律——光吸收基本定律“Lambert-Beer定律”是说明物质对单色光吸

收的强弱与吸光物质的浓度(c)和液层厚度(b)间的关系的定律,是光吸收的基本定律,是

紫外-可见光度法定量的基础。

Lambert定律——吸收与液层厚度(b)间的关系

Beer定律——吸收与物质的浓度(c)间的关系

“Lambert-Beer定律”可简述如下:

当一束平行的单色光通过含有均匀的吸光物质的吸收池(或气体、固体)时,光的一部分被

溶液吸收,一部分透过溶液,一部分被吸收池表面反射;

设:入射光强度为Io,吸收光强度为Ia,透过光强度为It,反射光强度为Ir,则它们之间

的关系应为:

Io=Ia+It+Ir(4)

若吸收池的质量和厚度都相同,则Ir基本不变,在具体测定操作时Ir的影响可互相抵消

(与吸光物质的c及b无关)

上式可简化为:Io=Ia+It(5)

实验证明:当一束强度为I0的单色光通过浓度为c、液层厚度为b的溶液时,一部分光

被溶液中的吸光物质吸收后透过光的强度为It,则它们之间的关系为:

称为透光率,用T%表示。

称为吸光度,用A表示

则A=-lgT=K·b·c(7)

此即Lambert-Beer定律数学表达式。

L-B定律可表述为:当一束平行的单色光通过溶液时,溶液的吸光度(A)与溶液的浓度

(C)和厚度(b)的乘积成正比。它是分光光度法定量分析的依据。

二.吸光度的加和性

ccc

设某一波长(l)的辐射通过几个相同厚度的不同溶液1,2n,其透射光强度分

III

别为1,2n,根据吸光度定义:这一吸光体系的总吸光度为

而各溶液的吸光度分别为:

吸光度的和为:

即几个(同厚度)溶液的吸光度等于各分层吸光度之和。

如果溶液中同时含有n中吸光物质,只要各组分之间无相互作用(不因共存而改变本身的吸

光特性),则:

AKCbKCbKCbAAA

=111+222+⋯⋯nnn=1+2+⋯⋯+n(10)

应用:①进行光度分析时,试剂或溶剂有吸收,则可由所测的总吸光度A中扣除,即以试剂

或溶剂为空白的依据;

②测定多组分混合物;

③校正干扰。

三.吸光系数

Lambert-Beer定律中的比例系数“K”的物理意义是:吸光物质在单位浓度、单位厚

度时的吸光度。

TK

一定条件(、l及溶剂)下,是物质的特征常数,是定性的依据。

K在标准曲线上为斜率,是定量的依据。常有两种表示方法:

ecbe

1.摩尔吸光系数():当用mol/L、用cm为单位时,用摩尔吸光系数表示,

单位为L/mol·cm

A=e·b·c

(11)

e与b及c无关。e一般不超过105数量级,通常:e

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