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紫外可见分光光度法——光的吸收定律
一.Lambert-Beer定律——光吸收基本定律“Lambert-Beer定律”是说明物质对单色光吸
收的强弱与吸光物质的浓度(c)和液层厚度(b)间的关系的定律,是光吸收的基本定律,是
紫外-可见光度法定量的基础。
Lambert定律——吸收与液层厚度(b)间的关系
Beer定律——吸收与物质的浓度(c)间的关系
“Lambert-Beer定律”可简述如下:
当一束平行的单色光通过含有均匀的吸光物质的吸收池(或气体、固体)时,光的一部分被
溶液吸收,一部分透过溶液,一部分被吸收池表面反射;
设:入射光强度为Io,吸收光强度为Ia,透过光强度为It,反射光强度为Ir,则它们之间
的关系应为:
Io=Ia+It+Ir(4)
若吸收池的质量和厚度都相同,则Ir基本不变,在具体测定操作时Ir的影响可互相抵消
(与吸光物质的c及b无关)
上式可简化为:Io=Ia+It(5)
实验证明:当一束强度为I0的单色光通过浓度为c、液层厚度为b的溶液时,一部分光
被溶液中的吸光物质吸收后透过光的强度为It,则它们之间的关系为:
称为透光率,用T%表示。
称为吸光度,用A表示
则A=-lgT=K·b·c(7)
此即Lambert-Beer定律数学表达式。
L-B定律可表述为:当一束平行的单色光通过溶液时,溶液的吸光度(A)与溶液的浓度
(C)和厚度(b)的乘积成正比。它是分光光度法定量分析的依据。
二.吸光度的加和性
ccc
设某一波长(l)的辐射通过几个相同厚度的不同溶液1,2n,其透射光强度分
III
别为1,2n,根据吸光度定义:这一吸光体系的总吸光度为
而各溶液的吸光度分别为:
吸光度的和为:
即几个(同厚度)溶液的吸光度等于各分层吸光度之和。
如果溶液中同时含有n中吸光物质,只要各组分之间无相互作用(不因共存而改变本身的吸
光特性),则:
AKCbKCbKCbAAA
=111+222+⋯⋯nnn=1+2+⋯⋯+n(10)
应用:①进行光度分析时,试剂或溶剂有吸收,则可由所测的总吸光度A中扣除,即以试剂
或溶剂为空白的依据;
②测定多组分混合物;
③校正干扰。
三.吸光系数
Lambert-Beer定律中的比例系数“K”的物理意义是:吸光物质在单位浓度、单位厚
度时的吸光度。
TK
一定条件(、l及溶剂)下,是物质的特征常数,是定性的依据。
K在标准曲线上为斜率,是定量的依据。常有两种表示方法:
ecbe
1.摩尔吸光系数():当用mol/L、用cm为单位时,用摩尔吸光系数表示,
单位为L/mol·cm
A=e·b·c
(11)
e与b及c无关。e一般不超过105数量级,通常:e
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