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β—tubulinⅢ、ERCC—1在非小细胞肺癌中的表达和临床意义

目的：检测β-tubulinⅢ、ERCC-1在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达情

况及其与生存期的关联性。方法：Envision法检测资料完整的120例NSCLC中

β-tubulinⅢ、ERCC-1的表达，所有病例均予以顺铂或紫杉醇为主的辅助联合化

疗，随访生存期。结果：β-tubulinⅢ在NSCLC中的阳性表达率小于正常肺组织

中，但差异无统计学意义（P0.05）。ERCC-1在NSCLC中的阳性表达率明显大

于正常肺组织（P＜0.05）。β-tubulinⅢ、ERCC-1的表达和性别、年龄、组织学

类型、TNM分期、淋巴结转移均无相关性（P0.05），β-tubulinⅢ的表达与分化

程度相关（P＜0.05）。β-tubulinⅢ（-）、ERCC-1（-）生存期最长，β-tubulinⅢ

（+）、ERCC-1（+）生存期最短。结论：β-tubulinⅢ可能参与介导肺癌的生长、

侵袭。β-tubulinⅢ（-）、ERCC-1（-）的NSCLC患者可能从以顺铂或紫杉醇为

主的辅助联合化疗中受益。

肺癌是目前世界各地中最常见的恶性肿瘤之一，且死亡率增长最快，WHO

肺癌居癌症死因第一位，对人类生命健康造成严重威胁。其中综合治疗仍然是占

比约80%的非小细胞性肺癌（NSCLC）的首选治疗方式，化疗占有重要地位，

但5年生存率改善幅度低于5%。探究其化疗效果欠佳的原因，主要为化疗药物

耐药，无法杀伤肿瘤细胞[1-3]。研究报道显示，微管蛋白β-tubulinⅢ可能与紫

杉醇耐药有关，切除修复交叉互补基因1（ERCC-1）可能与铂类耐药有关[3]。

本文采用回顾性研究，检测120例非小细胞肺癌组织β-tubulinⅢ、ERCC-1表

达情况及临床病理特征，表达水平与生存期的相关性，为临床提供依据，以更高

制定科学合理的化疗方案和预后评估手段。

1资料与方法

1.1一般资料选取2002年10月-2004年11月南昌大学第一附属医院的120

例非小细胞肺癌组织标本，均经电子支气管镜活检、经皮肺穿或外科手术切除，

作为NSCLC组，所有病例均予以顺铂或紫杉醇为主的辅助联合化疗，术前未行

放化疗，术后均经病理确诊为非小细胞肺癌；排除重大系统严重疾病，并传染性

疾病，不可耐受化疗者。其中男67例，女25例，年龄35～79岁，平均（56.3±12.3）

岁；病理分型：65例鳞癌（高分化16例，中分化26例，低分化23例），55例

腺癌（高分化18例，中分化21例，低分化16例）。另外取10例NSCLC患者

的距肿瘤病变10cm的無癌细胞浸润正常肺组织作为对照组，男8例，女2例。

本研究已通过本院伦理委员会审批，患者均知情同意并签署相关同意书。术后随

访时间3～5年。1.2试剂即用型β-tubulin抗体购自上海美吉生物公司，1∶200

ERCC-1抗体购自美国Amgen生物公司，Envision试剂盒购自美吉生物公司，兔

抗人多克隆抗体购自美国Amgen生物公司。

1.3实验方法检测β-tubulinⅢ、ERCC-1表达情况：采用免疫组化染色

（Envision法）。石蜡切片脱蜡和水化后，用pH7.4的PBS冲洗，3min/次，共

3次，使用微波炉修复组织抗原，每张切片上滴加

1滴或50μL3%H2O2溶液于室温孵育10min，以阻断内源性过氧化物酶。

PBS冲洗，3min/次，共3次，甩去PBS液，每张切片上滴加1滴或50μL的第

一抗，于室温孵育60min。PBS冲洗，3min/次，共

5次，甩去PBS液，每张切片上滴加1滴或50μL聚合物增强剂（试剂A），

于室温孵育，20min。PBS冲洗，3min/次，共3次，甩去PBS液，每张切片加

1滴或50μL酶标抗鼠/兔聚合物（试剂B），在室温下孵育30min，PBS冲洗，3

min/次，共3次，甩去PBS液，每张切片上