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新乡医学院分析化学实验课教案首页
授课教师姓名及职称：
一、实验名称分光光度法测定芦丁的含量
二、授课对象授课形式
药学实验教学
1．掌握比色分析的一般操作方法
三、教学目标
2．学习721型分光光度计的使用
1．标准溶液的配制
2．吸光度A的测定
四、教学内容
3．绘制标准曲线
4．芦丁片中芦丁含量的测定
五、教学安排1．讲解演示45min
与课时分配2．学生操作教师辅导115min
1．分光光度法的基本原理
六、授课重点
2．721型分光光度计的使用方法
1．强调721型分光光度计的正确使用
七、注意事项
2．保护比色皿
八、授课方法教师示范讲述，学生操作
九、使用教材《分析化学实验》自编教材
十、教研室
审查意见主任签字
新乡医学院化学教研室年月日
实验分光光度法测定芦丁的含量
一、实验目的
1．掌握比色分析的一般操作方法；
2．学习分光光度计的使用方法。
二、实验原理
分光光度法定量分析分为单组分定量分析，多组分定量分析，本实验是单组分定量分析，单组分定
量分析方法包括吸光系数法、校正曲线法、对照法等，分析中最常用的是校正曲线法。校正曲线法：先
配制一系列不同浓度的标准溶液，然后在选定的分析条件下测定吸光度，然后以浓度为横坐标，吸光度
为纵坐标作图，得到一条通过原点的直线，这条直线称为校正曲线，在相同的测定条件下，测得样品溶
液的吸光度，通过校正曲线就可以求出样品的浓度了。
本实验通过校正曲线法测定芦丁的含量，芦丁溶液的颜色较浅。不能直接用分光光度法进行测定，
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那么，需要用显色剂将其变为有颜色的溶液，芦丁与Al在亚硝酸钠碱性溶液中生成红色配合物，该红
色配合物最大吸收波长在510nm，所以可以在510nm测定吸光度。
三、仪器与试剂
721型分光光度计，容量瓶；芦丁标准品，60%乙醇，亚硝酸钠溶液（1:20），硝酸铝溶液（1:10），
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1mol∙L氢氧化钠。
四、实验步骤
1．标准溶液的制备
取120℃真空干燥至恒重的芦丁标准品约50mg精密称定，置于50mL容量瓶中，加60%乙醇适量，
水浴上微热，使溶解，放冷后用60%乙醇稀释至刻度，摇匀。
2．绘制标准曲线
精密吸取标准溶液0.00，1.00，2.00，3.00，4.00及5.00mL，分别置于50mL容量瓶中，各加60%
乙醇使成5.0mL，各精密加入亚硝酸钠溶液（1:20）0.5mL，摇匀，放置6分钟后，加硝酸铝溶（1:10)1.5mL，
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摇匀，放置6分钟，加1mol∙L氢氧化钠试液4mL，蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置15分钟。在510nm
波长下测定各溶液的吸光度。以浓度为横坐标，吸收度为纵坐标，绘制标准曲线。
3．样品测定
精密称取芦丁约50mg，置于50mL容量瓶中，加60%乙醇适
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