猪蓝耳病QYYZ株的荧光定量检测引物、探针及试剂盒 .pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利说明书

(10)申请公布号CN106119421A

(43)申请公布日2016.11.16

(21)申请号CN201610764604.2

(22)申请日2016.08.30

(71)申请人广东温氏食品集团股份有限公司

地址527400广东省云浮市新兴县新城镇东堤北路9号

(72)发明人宋志军罗小飞王东东潘永飞宋延华

(74)专利代理机构广州番禺容大专利代理事务所(普通合伙)

代理人刘新年

(51)Int.CI

C12Q1/70

C12Q1/68

C12N15/11

权利要求说明书说明书幅图

(54)发明名称

猪蓝耳病QYYZ株的荧光定量检测

引物、探针及试剂盒

(57)摘要

本发明公开了一种猪蓝耳病QYYZ

株的荧光定量检测引物、探针及试剂盒。

所述引物如SEQIDNO:1和SEQIDNO:2

所示，所述探针如SEQIDNO:3所示。所

述试剂盒包含所述引物和探针。所述荧光

定量检测方法为：将待检测样品的RNA经

过反转录得到DNA模板，利用所述引物和

探针进行荧光定量PCR扩增，并判读结

果。本发明提供的QYYZ株的荧光定量检

测体系，特异性和灵敏度均很高，操作便

捷、实用，可对猪繁殖与呼吸综合征变异

毒株QYYZ株和其它毒株进行快捷准确的

鉴别区分。

法律状态

法律状态公告日法律状态信息法律状态

权利要求说明书

1.一种猪蓝耳病QYYZ株的荧光定量检测引物,其特征在于,所述引物的基因序列为

SEQIDNO:1和SEQIDNO:2。

2.一种猪蓝耳病QYYZ株的荧光定量检测探针,其特征在于,所述探针基因序列为

SEQIDNO:3。

3.根据权利要求2所述的探针,其特征在于,所述探针的5’端标记荧光报告基团;所述

探针的3’端标记荧光淬灭基团。

4.根据权利要求3所述的探针,其特征在于,所述荧光报告基团为FAM;所述荧光淬灭

基团为BQ1。

5.一种猪蓝耳病QYYZ株的荧光定量检测试剂盒,其特征在于,包含权利要求1所述

的猪蓝耳病QYYZ株的荧光定量检测引物、以及权利要求2~4任一项所述的猪蓝

耳病QYYZ株的荧光定量检测探针。

6.根据权利要求5所述的检测试剂盒,其特征在于,包括:

(1)反转录部分:

RT预混液1:随机引物和dNTPmix;

RT预混液2:5倍反转录缓冲液,RNA酶抑制剂,反转录酶,不含RNA酶的双蒸水;

(2)定量PCR部分:

定量PCR预混液:定量PCR缓冲液,TaqDNA聚合酶;引物SEQIDNO:1、SEQID

NO:2和探针SEQIDNO:3;双蒸水。

7.猪蓝耳病QYYZ株的荧光定量检测引物、探针在荧光定量检测方法中的应用,其

特征在于,包括以下步骤:

(1)将待检测样品的RNA反转录的产物使用引物SEQIDNO:1、SEQIDNO:2和探

针SEQIDNO:3进行实时荧光定量PCR扩增;

荧光定量PCR的反应程序为95°C、5秒;60°C、35秒,按此反应条件做40个循环,其

中60°C、30秒收集荧光信号;

(2)结果判读。

说明书

技术领域

本发明属于分子生物学技术领域,具体涉及一种猪蓝耳病QYYZ株的荧光定量检测

引物、探针及试剂盒。

背景技术

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS),又称蓝耳病,是一种以妊娠母猪的繁殖障碍和仔猪的呼

吸道疾病为特征的病毒性传染病,该病已成为危害全球养猪业的主要疫病之一。近

年来,PRRSV的变异现象引起了人们