紫外可见分光光度法2.ppt

设：待测溶液浓度为cx，标准溶液浓度为cs(cscx)。则：Ax=εbcxAs=εbcsΔＡ＝Ａx－Ａs=εb(cx－cs）=εbΔc测得的吸光度相当于普通法中待测溶液与标准溶液的吸光度之差ΔＡ。第95页,共110页，5月，星期六，2024年，5月示差分光光度法（示差法）ΔＡ＝Ａx－Ａs=εb(cx－cs）=εbΔc测得的吸光度相当于普通法中待测溶液与标准溶液的吸光度之差ΔＡ。示差法测得的吸光度与Δc呈直线关系。由标准曲线上查得相应的Δc值，则待测溶液浓度cx：cx=cs+Δc第96页,共110页，5月，星期六，2024年，5月示差法标尺扩展原理：普通法：cs的T=10%；cx的T=5%示差法：cs做参比，调T=100%则：cx的T=50%；标尺扩展10倍第97页,共110页，5月，星期六，2024年，5月三、双波长分光光度法不需空白溶液作参比；但需要两个单色器获得两束单色光(λ1和λ2)；以参比波长λ1处的吸光度Aλ1作为参比，来消除干扰。在分析浑浊或背景吸收较大的复杂试样时显示出很大的优越性。灵敏度、选择性、测量精密度等方面都比单波长法有所提高。第98页,共110页，5月，星期六，2024年，5月ΔＡ＝Aλ2－Aλ1＝（ελ2－ελ1)bc两波长处测得的吸光度差值ΔＡ与待测组分浓度成正比。ελ1和ελ2分别表示待测组分在λ1和λ2处的摩尔吸光系数。第99页,共110页，5月，星期六，2024年，5月关键问题:关键问题是测量波长λ2和参比波长λ1的选择与组合。以两组分x和y的双波长法测定为例：设：x为待测组分，y为干扰组分，二者的吸光度差分别为ΔＡx和ΔＡy，则该体系的总吸光度差ΔＡx+y为：ΔＡx+y=ΔＡx+ΔＡy如何选择波长λ1、λ2有一定的要求。第100页,共110页，5月，星期六，2024年，5月第101页,共110页，5月，星期六，2024年，5月选择波长组合λ1、λ2的基本要求是：⑴选定的波长λ1和λ2处干扰组分应具有相同吸光度，即：ΔAy=ΔＡyλ2－ΔＡyλ1=0故：ΔＡx+y=ΔＡx=(εxλ2－εxλ1)bcx此时：测得的吸光度差ΔＡ只与待测组分x的浓度呈线性关系，而与干扰组分y无关。若x为干扰组分，则也可用同样的方法测定y组分。第102页,共110页，5月，星期六，2024年，5月第103页,共110页，5月，星期六，2024年，5月⑵在选定的两个波长λ1和λ2处待测组分的吸光度应具有足够大的差值。可采用作图法选择符合上述两个条件的波长组合。第104页,共110页，5月，星期六，2024年，5月四、导数分光光度法导数分光光度法在多组分同时测定、浑浊样品分析、消除背景干扰、加强光谱的精细结构以及复杂光谱的辨析等方面，显示了很大的优越性。利用吸光度(或透光度)对波长的导数曲线来进行分析：Ｉ＝Ｉ0e-εbc第105页,共110页，5月，星期六，2024年，5月假定入射光强度Ｉ0在整个波长范围内保持恒定dI0/dλ＝0则：dI/dλ＝－Ｉ0bce-εbcdε/dλ＝－Ｉ0bcdε/dλdI/dλ＝－Ｉ0bcdε/dλ一阶导数信号与试样浓度呈线性关系第106页,共110页，5月，星期六，2024年，5月测定灵敏度依赖于摩尔吸光系数对波长的变化率dε/dλ。吸收曲线的拐点处dε/dλ最大，故其灵敏度最高(见图）。同理可以导出其二阶和三阶导数光谱（略）第107页,共110页，5月，星期六，2024年，5月有机合物紫外光谱解析了解共轭程度、空间效应、氢键等；可对饱和与不饱和化合物、异构体及构象进行判别。紫外—可见吸收光谱中有机物发色体系信息分析的一般规律是：⑴若在200～750nm波长范围内无吸收峰，则可能是直链烷烃、环烷烃、饱和脂肪族化合物或仅含一个双键的烯烃等。第五节有机化合物紫外光谱解析第108页,共110页，5月，星期六，2024年，5月⑵若在270～350nm波长范围内有低强度吸收峰(ε＝10～100