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实验室主题文件编号XGYYJ-6-XB-202
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东莞市谢岗人民医院
沙眼衣原体实验室检测第1版第次修改
性病实验室
颁布日期:2012年1月1日
沙眼衣原体实验室检测
沙眼衣原体是引起尿道炎和宫项炎的重要病原菌。由于70%-80%女性和多
达50%男性常表现为无临床症状的感染,所以实验室诊断具有重要作用。未经治
疗的患者不仅容易传染性伴,同时易发男性附睾炎,女性盆腔炎和不育症。
1.沙眼衣原体细胞培养
1.1原理
沙眼衣原体是专性细胞内寄生的微生鼢,它自身不能产生能量,依赖于宿主
细胞提供。细胞培养为衣原体的生长提供了必要的条件。选用的细胞为衣原体感
染的敏感细胞,使用化学物质或幅射处理细胞,并用离心方法使衣原体接种物易
于进入细胞。在适宜的培养条件下,衣原体可在细胞浆内包涵体,特异性或非特
异性染色后可在显微下观察。
1.2材料
1.McCoy细胞。
2.胰酶„EDTA。
3.标本运输培养基。
4.衣原体生长培养基。
4.衣原体分离培养基。
5.碘染色液或姫姆萨染色液。
6.衣原体荧光杜克雷抗体试剂。
1.3方法
1.标本采集:男性:尿道2-3厘米处取材。
女性:宫项管内1-2厘米处取材,或尿道取材。
溃疡部位或腹沟横痃抽吸液。
标本置于运送培养基中,24小时接种,超过24小时应置于低温冰箱保存。
2.细胞复苏和传代:冻存细胞管于37℃速溶
↓内容物
内容物移至20ml培养基中
↓36℃CO2环境下培养过夜
更换生长培养基,再培养4-5天细胞成片
↓倒去培养液
加入5ml胰酶-EDTA洗涤
↓倒去洗涤液
加入5ml胰酶-EDTA液
↓室温放置5分钟,倒去液体
培养瓶置于37℃4分钟细胞脱落
↓
转移至10ml生长培养基
↓
加入10%DMSO
↓
分装保存于超低温冰箱备用
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制定者审核者批准者
黄金印罗衬银罗衬银
2011年12月1日2012年1月1日2012年1月1日
实验室主题文件编号XGYYJ-6-XB-202
第-
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