XB202沙眼衣原体实验室检测 .pdfVIP

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实验室主题文件编号XGYYJ-6-XB-202

第-1-页共7页

东莞市谢岗人民医院

沙眼衣原体实验室检测第1版第次修改

性病实验室

颁布日期:2012年1月1日

沙眼衣原体实验室检测

沙眼衣原体是引起尿道炎和宫项炎的重要病原菌。由于70%-80%女性和多

达50%男性常表现为无临床症状的感染,所以实验室诊断具有重要作用。未经治

疗的患者不仅容易传染性伴,同时易发男性附睾炎,女性盆腔炎和不育症。

1.沙眼衣原体细胞培养

1.1原理

沙眼衣原体是专性细胞内寄生的微生鼢,它自身不能产生能量,依赖于宿主

细胞提供。细胞培养为衣原体的生长提供了必要的条件。选用的细胞为衣原体感

染的敏感细胞,使用化学物质或幅射处理细胞,并用离心方法使衣原体接种物易

于进入细胞。在适宜的培养条件下,衣原体可在细胞浆内包涵体,特异性或非特

异性染色后可在显微下观察。

1.2材料

1.McCoy细胞。

2.胰酶„EDTA。

3.标本运输培养基。

4.衣原体生长培养基。

4.衣原体分离培养基。

5.碘染色液或姫姆萨染色液。

6.衣原体荧光杜克雷抗体试剂。

1.3方法

1.标本采集:男性:尿道2-3厘米处取材。

女性:宫项管内1-2厘米处取材,或尿道取材。

溃疡部位或腹沟横痃抽吸液。

标本置于运送培养基中,24小时接种,超过24小时应置于低温冰箱保存。

2.细胞复苏和传代:冻存细胞管于37℃速溶

↓内容物

内容物移至20ml培养基中

↓36℃CO2环境下培养过夜

更换生长培养基,再培养4-5天细胞成片

↓倒去培养液

加入5ml胰酶-EDTA洗涤

↓倒去洗涤液

加入5ml胰酶-EDTA液

↓室温放置5分钟,倒去液体

培养瓶置于37℃4分钟细胞脱落

转移至10ml生长培养基

加入10%DMSO

分装保存于超低温冰箱备用

-1-

制定者审核者批准者

黄金印罗衬银罗衬银

2011年12月1日2012年1月1日2012年1月1日

实验室主题文件编号XGYYJ-6-XB-202

第-

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