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《非洲猪瘟病毒一体化分子检测方法》.pdf

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ICS

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团体标准

T/CVMAXXXXX—XXXX

非洲猪瘟病毒一体化分子检测方法

Automaticintelligentmoleculardetectionmethod

forAfricanswinefevervirus

征求意见稿

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

中国兽医协会发布

T/CVMAXXXXX—XXXX

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的

规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由泰州蕾灵百奥生物科技有限公司提出。

本文件由中国兽医协会归口。

本文件起草单位:

本文件主要起草人:

I

T/CVMAXXXXX—XXXX

非洲猪瘟病毒一体化分子检测方法

1范围

本文件规定了非洲猪瘟病毒一体化分子检测方法的技术原理、试剂与耗材、仪器设备、操作方法和

结果判定。

本文件适用于猪唾液、血清或血浆、拭子(包括口鼻拭子、血拭子、肛拭子)、组织研磨液、种猪

精液中非洲猪瘟病毒核酸的检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,

仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本

文件。

GB19489实验室生物安全通用要求

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范

SN/T1193基因检验实验室技术要求

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1MAOPA技术

MAOPA(MagneticbeadsmediatedAll-in-OnePolymeraseAmplification)技术,即磁珠介导的一体

化聚合酶扩增技术,实现磁珠贯穿核酸检测的全流程,减少了样品核酸随着吸附、洗涤、洗脱直至扩增

逐级发生的损耗,具备较强的兼容性,可为各类核酸检测方法的一体化提供技术平台。

3.2Unigen系统

Unigen系统是基于MAOPA技术开发的智能软件、搭配精密硬件的全封闭智能分析系统,采用微流

控卡槽式芯片技术将核酸提取与分子扩增整合在一体化全封闭反应装置中。

4符号和缩略语

下列缩略语适用于本文件。

ASFV:非洲猪瘟病毒(AfricanSwineFeverVirus)

DNA:脱氧核糖核酸(DeoxyriboNucleicAcid)

PCR:聚合酶链式反应(PolymeraseChainReaction)

1

T/CVMAXXXXX—XXXX

5原理

本方法针对非洲猪瘟病毒P72基因序列设计特异性引物和探针,并根据随机DNA序列设计了内标引

物和探针,同时将核酸提取与荧光PCR扩增通过微流控卡槽式芯片技术整合为一体,病原核酸可

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