ADM基因转染MSCs移植对心衰大鼠心脏功能及心肌重构的影响的开题报告.pdfVIP

ADM基因转染MSCs移植对心衰大鼠心脏功能及心

肌重构的影响的开题报告

一、研究背景及意义

心衰是心脏病的一种严重形式，是由于心脏功能减弱以致不能满足

身体的需要而引起的一系列症状和体征，如气促、疲劳、体重增加等。

心衰是世界范围内的一种重要公共卫生问题，其患病率和死亡率不断上

升。虽然已有多种治疗方法，包括药物治疗、心脏起搏器、心脏转流术

等，但治愈仍是一个难题。干细胞移植治疗心衰是一种新兴的治疗方法。

近年来，研究表明多能干细胞和造血干细胞在心脏再生中的潜在应用价

值，但其临床应用仍受到一些限制。因此，研究成熟的骨髓间充质干细

胞（MSCs）作为基因载体，将相关基因导入MSCs，可大幅度提高移植

干细胞的生存率，有效促进心血管再生，改善心衰大鼠心脏功能，从而

成为一种潜在的治疗方案。

二、研究目的

本研究旨在探究ADM基因转染MSCs移植对心衰大鼠心脏功能及心

肌重构的影响，并进一步明确其作用机制。

三、研究计划

1.实验内容

(1)建立心衰大鼠模型：利用连续6周冠状动脉狭窄模型制备心衰大

鼠模型；

(2)分离及培养MSCs：从大鼠骨髓中分离纯化MSCs，进行扩增、鉴

定及培养；

(3)构建ADM基因质粒：采用PCR扩增ADM基因，将其克隆进入质

粒载体中；

(4)ADM基因转染MSCs：采用脂质体介导的方法将ADM基因质粒转

染MSCs，过表达转染效率；

(5)制备ADM基因转染MSCs移植液：将转染成功的MSCs收集制备

成移植液；

(6)心肌移植：将制备好的ADM基因转染MSCs移植液直接注射至心

肌组织内；

(7)检测心衰大鼠心肌功能：采用M模式超声心动图仪检测心衰大鼠

心脏功能，统计LVFS、LVEF值；

(8)追踪MSCs移植存活情况：采用荧光素酶体外实验（IVIS）检测

MSCs存活情况；

(9)检测心肌重构指标：采用实时荧光定量PCR和Westernblot检测

心肌重构指标基因表达情况。

2.实验时间表

(1)前期准备工作：2个月

(2)建立心衰大鼠模型及分离MSCs：2个月

(3)构建ADM基因质粒及ADM基因转染MSCs：2个月

(4)制备ADM基因转染MSCs移植液及心肌移植：1个月

(5)检测心衰大鼠心肌功能和心肌重构指标：1个月。

3.实验预期结果

(1)制备成功ADM基因载体和ADM基因转染MSCs；

(2)ADM基因转染MSCs移植能够显著改善心衰大鼠心肌功能；

(3)ADM基因转染MSCs移植具有促进心肌细胞增殖和减少心肌重构

的作用。

四、研究难点与创新点

1.研究难点

（1）心衰大鼠模型的构建；

（2）MSCs的分离、培养及鉴定；

（3）ADM基因载体构建及脂质体介导转染MSCs；

（4）注射后MSCs存活情况检测。

2.研究创新点

（1）应用ADM基因转染MSCs移植治疗心衰的方法进行研究；

（2）追踪MSCs存活情况、解析其作用机制；

（3）通过心肌功能检测和心肌重构指标检测明确ADM基因转染

MSCs移植对心衰大鼠的治疗作用。