原创力文档- 1、本文档共1页，可阅读全部内容。
- 2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
查看更多
ABTS法测酶活
1、先配制0.1mol/L的醋酸-醋酸钠缓冲液（pH=4.0）；
2、再配制0.5mmol/L的ABTS；（0.5mmol/LABTS：0.27434gABTS加入到1L纯水中溶解即可。（分子量为548.67））
3、在无菌的环境中提取1mL的粗酶液，放入EP管内；
4、用离心机对其离心（8000转2分钟），取上一定量的上清液，用醋酸-醋酸钠缓冲液进行稀释一定的倍数；
5、取一定量的ABTS试剂，和稀释后的酶液分别在不同的试管内进行水浴（40℃，10min）；也将比色皿冲洗干净放在干燥箱里，温度调到40℃；
6、尽量保持在40℃的温度下混合ABTS和稀释后的酶液（比例1:1），当两种液体混合时开始计时，记录下第30s和90s两个时间点分光光度计的显示数（λ=420nm）；
7、定义1个酶活力单位用每分钟1μmol的ABTS被转化所需的酶量。（原理是ABTS被Lac氧化，氧化产物的消光系数ε为3.6×104（mol/L）-1·cm-1），所以酶活的换算按照下列公式：
文档评论（0）