人类白细胞抗原血小板抗原检测技术.pptVIP

CCI=（输注后血小板计数-输注前血小板计数）×体表面积/输注血小板总数×1011输注血小板后1小时CCI低于10×109/L或24小时CCI低于7.5×109/L引起血小板输注无效的原因非免疫学原因免疫学原因非免疫学原因脾功能亢进感染发热药物作用DIC血小板的质量问题免疫学原因人类白细胞抗原(HLA)血小板特异性抗原(HPA)如检测到患者血清中含有HLA抗体或HPA抗体,即可判断病人的无效输注是由于同种免疫引起的今后避免输入相应的抗原其他临床应用输血后紫癜壹贰多发生在女性，有输血和妊娠史叁新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜肆与新生儿溶血病的发病机制相似伍特发性血小板性紫癜血小板血型（包括血小板抗原及对应抗体），在临床医学和输血实践中具有重要意义，利用可能的方法检测血小板抗体，可以提高血小板输注的安全性和有效性。血清学检测血小板免疫荧光试验（PIFT）：既可用于血小板抗原鉴定，又可以用于血小板抗体检测和交叉试验血小板抗原鉴定：待测血小板用于聚甲醛（PFA）或氯喹预处理，处理过的血小板与已知的特异性抗血清孵育，洗涤，再与标记了异硫氰酸荧光素的抗人球蛋白孵育，再次洗涤并在荧光显微镜下进行观察。利用已知抗原特异性的血小板细胞谱与待检血清混合反应，其余步骤与血小板抗原鉴定类似，最后根据血清血小板细胞谱的反应情况，来鉴定血清中抗体的特异性。PIFT的优点因为在显微镜下只观察荧光标记的血小板，所以可以避免由于细胞碎片等引起的非特异性反应。1多特异性的抗球蛋白可以识别2流式细胞术(FCM)1986年,Rosenfeld等发明了此技术。该法将待测血清和荧光标记的已知型别的血小板抗体孵育后，用流式细胞仪检测。FCM用于免疫性血小板减少症患者的血小板相关抗体及血小板膜糖蛋白检测,具有灵敏、快速、简便的特点,是适用于临床诊断的新方法。单克隆抗体免疫固定血小板抗原方法（MAIPA）：该法先制备羊抗鼠IgG包被的多孔板，另外，将鼠抗人血小板糖蛋白单克隆抗体和带有抗体的血小板共同孵育，再将孵育后的复合物加入多孔板，孵育，洗涤，最后加入酶联羊抗人抗体和酶反应底物后显色，定量测定血小板抗体。特点01此方法敏感度高、特异性强，即使是血小板上抗原数量很少的HPA-5抗原，也能检测出。MAIPA方法可灵敏地检测血小板特异性抗体。02简易致敏红细胞血小板血清学试验（SEPSA）：该法以抗人IgG抗体致敏红细胞为指示细胞，直接指示固相血小板抗原抗体免疫反应，检测血小板抗体。若血小板上存在抗体，则指示细胞呈扩散分布，为阳性；若无抗体，则指示细胞聚集在底部，呈扣状，为阴性。特点01该方法操作简单，微量，重复性、特异性和敏感性均较理想，固相化的血小板及抗IgG指示细胞能长久保存备用，可开展大量样本的检测工作。02仁爱为本精诚为强仁爱为本精诚为强仁爱为本精诚为强人类白细胞抗原检测技术，血小板抗原检测技术输血科朱伯平HLA(humanleukocyteantigen），(人类白细胞抗原)系统是目前所知人体最复杂的多态系统。自1958年发现(JeanDausset)第一个HLA抗原，到20世纪70年代，HLA便成为免疫、遗传学、免疫生物学和生物化学等学科的一个重要新兴研究领域。HLA功能生物学功能：器官和骨髓移植前供、受者组织相容性配型其他方面：亲子鉴定以及人类遗传学方面2011年06月03日,对于医生胡特而言，病人蒂莫西·雷·布朗就像漆黑抗艾研究道路上的一道亮光。这名被冠以“柏林病人”的特殊病患同时兼有白血病和艾滋病。在医学界看来，布朗已经是即将踏入坟墓的人，然而在接受骨髓移植后，布朗竟然奇迹般得以重生。这一事件震惊了整个医学界，医生们从他的身上看到了医学界的奇迹：终结艾滋。人类白细胞抗原(HLA)HLA抗原分布相当广泛，见于所有的有核细胞上，但在淋巴细胞上的密度最高血小板上的HLA抗原是血小板膜表面的固有结构成分，主要是HLA-I类的A、B位点的抗原HLA-I类抗原是引起血小板同种免疫和血小板输注无效的主要抗原，约占80%0102HLA抗原检测技术人类白细胞抗原检测技术已广泛应用于器官移植前的组织配型检测方法：血清学方法、细胞学方法和基因分型方法与临床输血的关系—HLA抗原可引起免疫应答→HLA抗体→发热性非溶血性输血反应和血小板输注无效020103血清学方法：是用一系列已知的抗HLA抗原的标准血清来检测未知淋巴细胞表面的HLA抗原型别。微量淋巴毒实验原理：淋巴细胞膜表面具有HLA抗原，而分型血清中含有抗特定HLA抗原的细胞毒抗体，该抗体与淋巴细胞膜上的相应的HLA抗原结合后在补体的参与下损伤