DB32T 2385-2013 梨果实主要风味品质的测定——HPLC 法.docxVIP

ICS67.080.01B31

备案号：41080-2014DB32

江苏省地方标准

DB32/T2385—2013

梨果实主要风味品质的测定——HPLC法

HPLCAnalysisRegulationforDeterminationofMainFlavorQualityinPearFruit

2013–12–30发布2013–01–20实施

江苏省质量技术监督局发布

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DB32/T2385—2013

前言

为了更方便、更有效地检测梨果实主要风味指标，为评价不同梨果实风味品质提供参考依据，特制订本标准。

本标准编写格式按GB/T1.1-2000《标准化工作导则第一部分标准的机构和编写的规则》和GB/T1.2-2002《标准化工作导则第2部分标准中规范性技术要素内容的确定方法》的规定编写。本标准由南京农业大学提出。

本标准由南京农业大学园艺学院负责起草。

本标准主要起草人：张绍铃、陶书田、齐开杰、吴俊、高永彬、吴巨友、谢智华、李梦。

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DB32/T2385—2013

梨果实主要风味品质的测定--HPLC法

1范围

本标准规定了梨果实可溶性糖、有机酸及维生素C（Vc）等主要风味指标的检测技术。本标准适用于梨果实可溶性糖、有机酸及Vc的测定。

2原理

液氮研磨梨果实样品，可以使样品磨得更细、更充分，使提取率增加。37℃恒温超声波处理能充分提取梨果实可溶性糖和有机酸；超声波冰浴浸提可充分提取果实中Vc。高效液相色谱（HPLC）准确、可靠测定梨果实可溶性糖、有机酸及Vc等成分。

3试剂

果糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、苹果酸、柠檬酸、莽草酸、奎宁酸、琥珀酸、草酸及维生素C均为色谱纯；其余化学试剂为分析纯；溶液配制采用超纯水（18.2MΩ·cm）。

3.120mmol/L磷酸氢二钠缓冲液：称取2.400g磷酸二氢钠，溶解于超纯水，用磷酸调配pH2.6，用容量瓶定容至1L。

3.22%的甲醇：20ml甲醇溶于980ml的20mmol/L磷酸氢二钠缓冲液。

3.35%的甲醇：50ml甲醇溶于950ml的20mmol/L磷酸氢二钠缓冲液。

3.480%的甲醇：取80ml甲醇于100ml容量瓶中，加超纯水定容至100ml。

3.52%偏磷酸缓冲液：称取2.000g偏磷酸结晶，用超纯水定容至1L。

4仪器

4.1冰箱：温度可调至-16℃~-20℃。

4.2研钵。

4.3天平：精度分别为0.001g和0.0001g。

4.4Milli-Q超纯水系统。

4.5Waters1525液相色谱仪。

4.5.1TransgenomicCOREGET-87碳水化合物柱。

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4.5.2TransgenomicCARBSepCoregel87Ccartridge保护柱。

4.5.3AgilentZorbaxrSB-Aq柱（4.6mm×250mm，5μm）。

4.5.4Waters2414示差折光检测器。

4.5.5Waters2487紫外检测器。

4.6RE-3000真空旋转蒸发器。

4.7高速冷冻离心机。

4.8恒温水浴锅。

4.9制冰机。

5分析步骤

5.1试样制备

取成熟梨果实10～20个（小型果可适当增加果个数），去除果皮和果核，将果肉切成约1cm3的块，混匀。

5.2可溶性糖、有机酸及维生素C提取

5.2.1可溶性糖和有机酸的提取：取一定量的果肉，用液氮磨成粉，准确称取2g粉末状的果肉，加入提取液（80%的乙醇溶液），37℃水浴加热30min，超声波提取15min，12000g×15min×4℃条件离心，将上清转移至25ml容量瓶中，重复提取三次，定容，然后取2ml用旋转蒸发仪蒸干，再用超纯水定容1ml，再经过C18SPE柱和0.45μmSep-Pak微孔滤膜过滤。

5.2.2维生素C的提取：取一定量的梨果肉，经液氮磨成粉，