糖类蛋白质脂肪的鉴定.ppt

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感谢大家观看第32页,共32页,5月,星期六,2024年,5月**关于糖类蛋白质脂肪的鉴定检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1.实验原理第2页,共32页,5月,星期六,2024年,5月斐林试剂苏丹Ⅲ橘黄色红色砖红色沉淀紫色苏丹Ⅳ双缩脲试剂鉴定物质试剂实验现象还原性糖脂肪蛋白质淀粉碘蓝色生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验原理第3页,共32页,5月,星期六,2024年,5月方法步骤:1.实验材料、仪器和试剂的选择2.设计记录表格,记录预测结果3.检测的方法步骤(1)还原糖的检测和观察;(2)脂肪的检测和观察;(3)蛋白质的检测和观察;第4页,共32页,5月,星期六,2024年,5月第5页,共32页,5月,星期六,2024年,5月第6页,共32页,5月,星期六,2024年,5月第7页,共32页,5月,星期六,2024年,5月选材:含糖量较高的白色或近于白色的植物组织(排除色素对显色的干扰),苹果、梨最好。实验流程(步骤)1.可溶性还原糖制备组织样液:制浆:去皮、切块、研磨,过滤:(用单层纱布)取液:(2mL)显色反应现象:(用前混匀)50~65.C水浴加热2min第8页,共32页,5月,星期六,2024年,5月还原糖的检测和观察:第9页,共32页,5月,星期六,2024年,5月还原糖的检测结果第10页,共32页,5月,星期六,2024年,5月第11页,共32页,5月,星期六,2024年,5月第12页,共32页,5月,星期六,2024年,5月2.脂肪的鉴定取材:花生种子(浸泡3-4h),去皮,将子叶削成薄片制片:①选取最薄的薄片移至载玻片中央②在薄片上滴加苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染液2-3滴,染色2-3min③滴加体积分数为50%的酒精溶液1—2滴,洗去浮色(多余的苏丹Ⅲ)④吸去余液,滴1-2滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装片显微观察:先在低倍镜下找到已着色的薄片,后用高倍镜观察现象:有被染成橘黄色(或红色)的脂肪微粒脂肪微粒第13页,共32页,5月,星期六,2024年,5月脂肪的检测结果第14页,共32页,5月,星期六,2024年,5月第15页,共32页,5月,星期六,2024年,5月3.蛋白质的鉴定选材与制备组织样液:黄豆组织样液(或鸡蛋蛋清稀释液)[黄豆浸泡→去皮→切片→研磨→过滤→滤液]显色反应现象:无色紫色或紫红色(创设碱性条件)(提供Cu2+)第16页,共32页,5月,星期六,2024年,5月蛋白质的检测结果第17页,共32页,5月,星期六,2024年,5月蛋白质的鉴定----双缩脲试剂鸡蛋清溶液NaOH溶液滴加CuSO2溶液,每次滴加均需摇匀结果显示:紫色第18页,共32页,5月,星期六,2024年,5月1.你的预测与实验结果是否一致?2.小组间交流实验结果。你有什么发现?3.全班共检测了多少种生物材料?这些生物材料中有机化合物的种类、含量一样吗?这对我们选择食物有什么启发?讨论第19页,共32页,5月,星期六,2024年,5月4.淀粉的鉴定取材:马铃薯匀浆检测:碘液2滴现象:摇匀后变成蓝色第20页,共32页,5月,星期六,2024年,5月问题探讨:1、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时,为什么要留出一部分样液?作对照2、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加3~4滴而不能过量?过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应,使溶液呈蓝色,而掩盖生成的紫色。3、为什么斐林试剂要现配现用,不能放置太久?时间太长,Cu(OH)2悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。深化第21页,共32页,5月,星期六,2024年,5月比较项目试剂及成分原理溶液浓度方法加热与否结果可溶还原糖的鉴定斐林试剂NaOH和CuSO4砖红色沉淀蛋白质的鉴定双缩脲试剂NaOH和CuSO4溶液呈紫色4、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同?新配制的Cu(OH)2溶液在碱性环境下的Cu2+NaOH浓度为0.1g/mLCuS04浓度为0.05g/mLNaOH浓度为0.1g/mLCuS04浓度为0.01g/mL先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合,而后立即使用。先加入Na0H1mL,然后再加CuS044滴,摇匀。(不能过量)水浴加热不需要第22页,共32页,5月,星期六,2024年,5月5、

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