人教版高考生物学一轮总复习精品课件 选择性必修3 生物技术与工程 第十一单元 生物技术与工程 第59讲 基因工程的基本工具与操作程序.ppt

***********************杂交带落实概念1.判断对错××（3）将目的基因导入双子叶植物一般采用农杆菌转化法。()√（4）抗虫基因即使成功地插入植物细胞染色体上也未必能正常表达。()√×√提示：变性、复性、延伸做实命题考向基因工程的操作程序甲乙引物Ⅱ和引物ⅢD转化白色普通大肠杆菌（一定浓度的重金属）镉菌体过滤、沉淀归纳总结农杆菌转化法中的两次拼接和两次导入B易混辨析区别启动子、终止子、起始密码子、终止密码子********************第十一单元生物技术与工程第59讲基因工程的基本工具与操作程序01考点一基因工程的基本工具02考点二基因工程的操作程序01考点一基因工程的基本工具夯实基础1.基因工程的概念理解分子遗传性状2.基因工程的基本工具（1）限制性内切核酸酶（限制酶）核苷酸序列磷酸二酯键一种特定的脱氧核苷酸序列黏性末端特别提醒（3）基因进入受体细胞的载体质粒稳定保存限制酶切割位点落实概念1.判断对错（1）切割质粒的限制性内切核酸酶均能特异性地识别6个核苷酸序列。()×（2）载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因。()×××√（6）载体的作用是携带目的基因导入受体细胞中,使之稳定存在并表达。()√外来病原物的危害图解氨苄青霉素抗性基因——标记基因的作用做实命题考向基因工程的基本工具D模型建构图解限制酶的选择原则变式训练作为基因工程的运输工具——载体，必须具备的条件及理由对应不正确的是()CA.对宿主细胞无伤害，不影响宿主细胞的正常生命活动B.具有多个限制酶切割位点，以便于目的基因的插入C.具有某些标记基因，以便目的基因能够准确定位与其结合D.能够在宿主细胞中稳定保存并大量复制，以便提供大量的目的基因02考点二基因工程的操作程序夯实基础1.目的基因的筛选与获取（1）筛选合适的目的基因①目的基因:在基因工程的设计和操作中,用于改变______________或获得______________等的基因。主要是指____________的基因。②筛选目的基因的方法:从相关的已知____________清晰的基因中进行筛选是较为有效的方法之一。受体细胞性状预期表达产物编码蛋白质结构和功能目的基因①原理:________________。②条件变性延伸指数形式琼脂糖凝胶电泳2.基因表达载体的构建（1）构建基因表达载体的目的①使目的基因在受体细胞中__________,并且可以______给下一代。②使目的基因能够______和发挥作用。稳定存在遗传表达（2）基因表达载体的组成（3）基因表达载体的构建过程3.将目的基因导入受体细胞生物类型受体细胞常用方法转化过程植物体细胞花粉管通道法①用微量注射器直接注入______;②借助花粉管通道进入____________________子房胚囊农杆菌转化法生物类型受体细胞常用方法转化过程动物______________________受精卵显微注射技术续表续表拓展延伸基因工程操作程序中的两个注意点（1）目的基因的插入位点不能随意设置。基因表达需要启动子与终止子的调控，所以目的基因的插入位点应在启动子与终止子之间。（2）若目标产物是糖蛋白或有生物活性的胰岛素等，则必须用真核生物酵母菌（含内质网、高尔基体，可对蛋白质进行加工和分泌）作为受体细胞。一般不用支原体，因为其营寄生生活；一定不能用哺乳动物成熟的红细胞，因为其无细胞核，不能合成蛋白质。4.目的基因的检测与鉴定..目的基因*******************************************