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浙江省第六届大学生生命科学学科竞赛实验记录序号:58
实验时间:10月01日11:30-20:00请勿透露学校、教师和个人信息
流式细胞术检测细胞凋亡和细胞内ROS(3)
【实验结果】
1.细胞凋亡实验结果:
AnnexingⅤ-FITC/PI双染色的细胞在流式细胞仪上分为4个区域。其中Q1区为机械性损伤的细胞碎
片,Q2区为中晚期凋亡细胞和坏死细胞,Q3区为活细胞,Q4区为早期凋亡细胞,Q2+Q4所占百分比为
细胞的总凋亡率。如图1表1所示。与正常对照组5%±2%的总凋亡率相比,模型组的总凋亡率为43%±5
%,差异显著,P0.01;麦冬多糖从25μg/mL到200μg/mL干预组其细胞的总凋亡率分别为25±5%,24±2
%,25±6%,26±4%,与模型组相比差异显著P0.01;各药物组之间无明显的差别P0.05。
表1流式细胞术检测HUVEC细胞凋亡(XS,n=3)
组别细胞总凋亡率(Q2+Q4)
对照组5±2%
模型组43±5%##
25±5%**
OJP1-25组
24±2%**
OJP1-50组
OJP1-100组25±6%**
26±4%**
OJP1-200组
##:与正常组比较P0.01;**:与模型组比较P0.01OJP1-25,麦冬多糖25mg/kg组;OJP1-50,麦冬
多糖50mg/kg组;OJP1-100,麦冬多糖100mg/kg组;OJP1-200,麦冬多糖200mg/kg组。
浙江省第六届大学生生命科学学科竞赛实验记录序号:58
实验时间:10月01日11:30-20:00请勿透露学校、教师和个人信息
图1流式细胞术检测HUVEC细胞凋亡
2.细胞内ROS检测结果:
如图2所示。与正常对照组相比,模型组细胞经HO损伤后,细胞ROS含量显著增加(P0.01);
22
与模型组相比,不同浓度的麦冬多糖干预后ROS的含量均显著降低(P0.05,P0.01)。从图可见,麦
冬多糖浓度从200μg/mL降低到50μg/mL,ROS的含量逐渐减少。麦冬多糖浓度减低到25μg/mL时期ROS
的含量又稍微增高。
浙江省第六届大学生生命科学学科竞赛实验记录序号:58
实验时间:10月01日11:30-20:00请勿透露学校、教师和个人信息
注:##:与正常组比较P0.01;*:与模型组比较P0.05;**:与模型组比较P0.01。25:麦冬多糖
25μg/mL组;50:麦冬多糖50μg/mL组;100:麦冬多糖100μg/mL组;200:麦冬多糖200μg/mL组。
图2麦冬多糖对HO损伤HUVEC细胞ROS的影响(XS,n=6)
22
【结果讨论】
HO可诱导细胞的氧化损伤,而氧化反应可以参与内皮细胞病理变化的各个环节,在血管性疾病的
22
病理过程中起非常重要的作用。氧化损伤的早期,表现为多种特征的细胞凋亡。有研究报道HO诱导细
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