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食欲素A对绵羊卵巢颗粒细胞P-AMPK与P-ERK信号通路
的影响
王伟平;徐晓静;杜晨光;马春燕;米焱;刘永志
【摘要】为研究食欲素A对绵羊卵巢能量代谢及生长发育的调节作用,在体外培
养黄体化颗粒细胞,用浓度为0.05,0.10μg/mL的食欲素A刺激细胞后,分
别于0,2,6,12,24h提取细胞总蛋白,采用WesternBlot法对P-AMPK及
P-ERK的表达量进行检测。结果显示,食欲素A刺激细胞2h,0.05,0.10μg
/mL剂量组的P-AMPK表达量与对照组相比均极显著提高(P<0.01),食欲
素A刺激细胞6h,0.05,0.10μg/mL剂量组P-AMPK的表达量均达到最高
值(P<0.01),且0.10μg/mL剂量组表达量明显高于0.05μg/mL剂量
组;食欲素A刺激细胞2h,0.05,0.10μg/mL剂量组的P-ERK表达量与对
照组相比均极显著提高(P<0.01),食欲素A刺激细胞24h,0.10μg/mL
剂量组的P-ERK表达量极显著高于平台期(6~12h)(P<0.01)并达到最高
值。表明食欲素A通过P-AMPK和P-ERK途径参与黄体能量代谢及生长发育的
调节,从而进一步参与生殖机能的调控。%Inordertoinvestigatetheeffectof
orexinsAontheenergymetabolism,growthanddevelopmentofsheep
ovary,theluteinisinggranulosacellswereisolatedandculturedin
vitro.Thepassageluteinisinggranulosacellsweretreatedwith0.05,0.10
μg/mLoforexinsA,andthetotalproteinsofthecellswereextractedat
0,2,6,12,24htreatment,respectively.TherelativeexpressionofP-AMPK
andP-ERKweredeterminedbyWesternBlot.Theresultsshowedthatthe
expressionofP-AMPKofthecellstreatedwith0.05,0.10μg/mLoforexinsA
2haftertreatmentweresignificantlyupregulatedcomparedwiththatof
control(P0.01),respectively.TheexpressionofP-AMPKofthecellstreated
with0.05,0.10μg/mLoforexinsA6htreatmentreachedtheextremevalue
(P0.01),respectively,andexpressionofP-AMPKofthecellstreatedwith
0.10μg/mLoforexinsAweresignificantlyhigherthanthatofthe0.05
μg/mLtreatedgroup.TheexpressionofP-ERKofthecellstreatedwith
0.05,0.10μg/mLoforexinsA2htreatmentweresignificantlyupregulated
comparedwiththatofcontrol(P0.01),respec-tively.Theexpressionof
P-ERKofthecellstreatedwith0.10μg/mLoforexinsA24htreatmentwere
significantlynbsp;higherthanthatofthepla
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