最新 肝癌转基因小鼠模型研究进展-精品 .pdfVIP

肝癌转基因小鼠模型研究进展

HBV感染动物模型的发展对理解病毒复制、疾病发病机理，尤其是对鉴定

HBV感染治疗的候选药物是很重要的。下面是小编搜集整理的相关内容的论

文，欢迎大家阅读参考。

摘要：肝细胞癌是全球范围内的恶性肿瘤，由于其进展迅速、易于复发转

移，早期诊断和有效治疗一直是临床难题，对于肝癌的发病机制也亟待进一步

阐明。利用基因工程手段构建的肝癌转基因小鼠模型，为肝癌发病机制研究和

药物筛选提供了宝贵的研究材料。结合经典研究与近年进展，对常用肝癌转基

因小鼠模型的构建方法、模型特点、特别是应用研究状况进行了分类介绍，并

展望了未来发展的方向。

关键词：肝细胞癌;转基因;小鼠模型

引言：

1.肝细胞癌(Hepatocellularcarcinoma，HCC)是一种致死率很高的恶性肿

瘤，2012年全球范围内发病率位居肿瘤第五位，死亡率高居肿瘤第二位[1]。

严峻的临床诊治形势对HCC发生及转移机制研究提出迫切需求，HCC相关机制

的深入阐释对HCC早期诊断、药靶研发及治疗预后具有重要意义。但HCC致病

因素多，病程复杂，涉及通路广，因此研究难度较大，其发生发展机制目前尚

不完全清楚。

2.动物模型作为重要的研究手段，在HCC发生发展机制研究中发挥了不可

或缺的作用。化学诱导、原位异位移植及转基因等方法在目前HCC动物模型构

建中较为常用。转基因动物模型与其他常用HCC动物模型相比，在研究特殊基

因在HCC发生过程中的作用或不同基因间的相互作用，以及与肝脏特异性致癌

物之间的关系中具有独特优势，迅速成为新的研究热点。本文将对近年来常用

的HCC转基因小鼠模型进行分类介绍，并对其在HCC相关机制研究及药物筛选

中的应用进行综述，旨为相关领域研究者提供参考。

一、HCC转基因动物模型概况

转基因动物模型是通过基因工程方法导入或敲除动物体内特定基因，从而

影响动物性状表达并产生稳定遗传修饰的动物模型。1982年，Gordon等[2]首

次利用显微注射法成功构建转基因小鼠，此后转基因动物模型得到快速发展和

广泛应用。HCC转基因模型的实验动物多为CD1、C57BL/6×CBA/J、

C57BL/6×DBA2等品系的小鼠。HCC转基因小鼠主要通过重组基因敲入(Knock-

in)或目的基因敲除(Knock-out)构建，利用显微注射法将重组基因导入受精卵

是构建转基因小鼠的经典方法。另外，通过逆转录病毒介导等方式对小鼠胚胎

干细胞进行基因靶向修饰也较常用。外源重组基因构建时通常包含肝脏特异性

蛋白启动子元件，可在肝脏进行组织特异性表达。白蛋白(Albumin)启动子是最

常用的启动子。此外，α-1-抗胰蛋白酶(α-1-antitrypsin，AAT)、金属硫蛋

白(Metallothionein)等启动子也有较多应用。敲入动物体内的外源基因可以为

单基因(如HBx、SV40等)，也可以为双基因(如c-Myc+TGF-α、β-Catenin+H-

ras等)，单基因敲入成功率较双基因的成功率高，但发生HCC所需时间较长。

根据所修饰基因的不同，HCC转基因小鼠模型可主要分为病毒基因转基因模

型、原癌基因转基因模型、生长因子及肿瘤微环境相关基因转基因模型等，具

体信息参见表1。

二、病毒基因转基因模型

病毒基因转基因模型所采用的基因主要有乙型肝炎病毒

(HepatitisBvirus，HBV)和丙型肝炎病毒(HepatitisCviral，HCV)等肝炎病毒

基因及猴空泡病毒(Simianvacuolatingvirus，SV40)等，其中肝炎病毒转基因

模型是目前最常用的模型，SV40病毒近年也受到较多关注，成为常用的建模方

法之一。

2.1HBV转基因模型

HBV感染是全球范围内HCC的主要诱因之一。HBV在长期感染宿主的情况

下，病毒基因可整合至宿主基因组中，导致基因突变、染色体不稳定及基因组

重排，从而引发HCC。HBV病毒基因组包括4个开放阅读框，分别为编码包膜蛋

白的S基因(Surface)、编码e抗原和核心抗原的C基因(Core)、编码聚合酶的

P基因(Polymerase)以及编码HBx蛋白的X基因。X基因是目前构建HBV转基因

HCC模型时采用最多的基因，其编码产物HBx蛋白是一个反式转录激活因子，

可促进一系列原癌基因的表达，诱导HCC产生。K