DB4403T 528-2024 水稻高效诱变育种技术规程.docx

ICS65.020

CCSB05

DB4403

深 圳 市 地 方 标 准

DB4403/T528—2024

水稻高效诱变育种技术规程

Codeofpracticeforhighefficiencymutagenesisbreedinginrice

2024-11-15发布 2024-12-01实施

深圳市市场监督管理局 发布

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目 次

前言 Ⅱ

范围 1

规范性引用文件 1

缩略语 1

术语和定义 1

仪器与试剂 1

水稻EMS诱变育种程序 2

供试材料选择 2

水稻种子预处理 2

EMS诱变处理 2

发芽试验 2

诱变后代的种植与筛选 2

优良株系鉴定 3

育种档案 3

参考文献 4

I

前 言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件由深圳市市场监督管理局提出并归口。

本文件起草单位：深圳市农业科技促进中心、深圳洁田模式生物科技有限公司。

本文件主要起草人：杨晓怀，唐晓艳，金曼，张维乐，陈子晟，陈雷，曾艳红，李永红，陈红娜，周志豪，曹孔江，陈敏，鲁勇，刘志宏。

II

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水稻高效诱变育种技术规程

范围

本文件规定了水稻EMS诱变育种涉及的仪器与试剂、水稻EMS诱变育种程序、供试材料选择、水稻种子预处理、EMS诱变处理、发芽试验、诱变后代的种植与筛选、优良株系鉴定以及育种档案等方面的技术要求。

本文件适用于利用EMS诱变育种技术进行水稻品种选育。

规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件。不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T3543.4—1995 农作物种子检验规程 发芽试验GB4404.1 粮食作物种子 第1部分：禾谷类

术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

甲基磺酸乙酯 ethylmethanesulfone

一种强效化学诱变剂，属于烷化剂诱变最常用的一种，需避光保存。

水稻EMS诱变 EMSmutagenesisofrice

利用甲基磺酸乙酯（4.1）处理水稻种子。

缩略语

下列缩略语适用于本文件。

EMS：甲基磺酸乙酯（EthylMethaneSulfone）

仪器与试剂

仪器设备

仪器包括但不限于以下内容：

通风橱；

数种设备：数粒板或电子自动数粒仪等；

发芽器具：发芽箱、发芽室、发芽皿、发芽盘等。

试剂

EMS、50mmol磷酸钠缓冲液（pH7.0）、氢氧化钠或硫代硫酸钠等。

水稻EMS诱变育种程序

水稻EMS诱变育种程序应包括供试材料选择、水稻种子预处理、EMS诱变处理、发芽试验、诱变后代的种植与筛选以及优良株系鉴定六个阶段。

供试材料选择

应选择符合GB4404.1规定的水稻种子作为供试材料。

水稻种子预处理

水稻种子应在25～30℃条件下，用清水浸泡48小时，每24小时换一次水。

水稻种子浸泡48小时后，用清水冲洗干净并稍晾干。

EMS诱变处理

EMS处理液应现配现用。应在通风橱中用50mmol磷酸钠缓冲液（pH7.0）配制体积分数为80%的EMS处理液。

水稻种子应完全浸没于EMS处理液中，并在28℃暗条件下浸泡处理12小时，期间每隔1小时搅拌混匀。

EMS诱变处理结束后，倒出EMS处理液。用清水清洗水稻种子后控干水分，重复不少于5次，除去EMS残留。

EMS处理液及清洗废水应统一收集并装入废液桶中，可采用氢氧化钠（终浓度1mol）中和处理，并在阳光下暴晒2～3天；或5%硫代硫酸钠，作为解毒剂和终止剂处理废液。

废弃物及废液应按照实验室管理要求集中标记存放，并通过具有资质的固废危废处理公司进行回收处理。

操作者应穿着实验服，佩戴防护手套、口罩、护目镜等。

发芽试验

按照GB/T3543.4-1995要求，对EMS诱变处理后的水稻种子进行发芽试验。

统计1000粒水稻种子的发芽率，每200粒水稻种子作为一个样品，做好发芽率结果统计记录。

经EMS诱变后的水稻种子发芽率在50～70%范围内，诱变材料可进行苗床播