3.2.2 将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定课件-高二下学期生物人教版选择性必修三.pptx

第2课时将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定第3章基因工程人教版高中生物选择性必修3

学习目标1.列举将目的基因导入植物细胞、动物细胞和微生物细胞的方法。2.列举检测与鉴定目的基因在受体细胞中是否稳定维持和表达其遗传特性的方法。3.能够用流程图的形式概括出基因工程的基本操作程序。4.针对人类生产或生活中的某一需求，能运用基因工程技术尝试设计获得某一转基因产品的方案。

情境导入转基因抗虫棉目的基因的筛选与获取基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定1997年，我国政府首次批准商业化种植转基因抗虫棉。到2015年，我国已育成转基因抗虫棉新品种100多个，减少农药用量40万吨，增收节支社会经济效益450亿元。

将目的基因导入受体细胞一目的基因的检测与鉴定二目录

目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化。实质：将目的基因整合到受体细胞基因组中。一将目的基因导入受体细胞一将目的基因导入受体细胞的方法导入植物细胞导入动物细胞导入微生物细胞农杆菌转化法花粉管通道法显微注射法Ca2+转化法（我国科学家独创）（常用）转化的概念：

感受态细胞Ca2+处理细胞重组基因表达载体与感受态细胞混合感受态细胞吸收重组DNA分子42℃,1min冰上3minCa2＋处理常用原核生物作为受体细胞，其中以大肠杆菌应用最为广泛，一般先用Ca2＋处理大肠杆菌细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，然后再将重组的基因表达载体导入其中。一将目的基因导入受体细胞一1.导入微生物细胞1操作方法：2过程：

将新鲜的从叶片上取下的圆形小片与农杆菌共培养，然后筛选转化细胞，并再生成植株将花序直接浸没在含有农杆菌的溶液中一段时间，然后培养植株并获得种子，再进行筛选、鉴定等导入体细胞导入受精卵将目的基因插入Ti质粒的T-DNA中，通过农杆菌的转化作用，使目的基因进入植物细胞。一将目的基因导入受体细胞一2.导入植物细胞农杆菌转化法1操作方法：

分析将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定任务1．在用土壤农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞的过程中，一定要将目的基因插入Ti质粒的T－DNA上的原因是什么？大型环状DNA（可转移的DNA）农杆菌细胞内含有Ti质粒，当它侵染植物细胞后，能将Ti质粒上的T-DNA（可转移的DNA）转移到被侵染的细胞，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上。

构建表达载体导入植物细胞目的基因插入植物细胞染色体DNA上表达新性状转入农杆菌植物组织培养Ti质粒目的基因2过程：一将目的基因导入受体细胞一2.导入植物细胞

第一次拼接是将目的基因拼接到Ti质粒的T-DNA上；第二次拼接指被插入目的基因的T-DNA拼接到受体细胞染色体DNA上。第一次导入是将含目的基因的重组Ti质粒导入农杆菌；第二次导入是指含目的基因的T-DNA导入受体细胞。第一次拼接第二次拼接第一次导入第二次导入一将目的基因导入受体细胞一2.导入植物细胞两次拼接和两次导入：

方法1方法2a.用微量注射器将含目的基因的DNA溶液直接注入子房中b.在植物受粉后的一定时间内，剪去柱头，将DNA溶液滴加在花柱切面上，使目的基因借助花粉管通道进入胚囊导入受精卵（我国科学家独创）适用生物：开花植物花粉管通道法一将目的基因导入受体细胞一2.导入植物细胞

显微注射法示意图普通鼠与生长速度加快的转基因鼠目的基因的表达载体提纯取卵（受精卵）显微注射受精卵发育获得具有新性状的动物①个体大，易操作。②受精卵全能性高，易培养成完整个体。一将目的基因导入受体细胞一3.导入动物细胞显微注射法1操作方法：2过程：

生物种类植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法受体细胞转化过程农杆菌转化法显微注射技术Ca+处理法体细胞或受精卵受精卵原核细胞将目的基因插入Ti质粒的T-DNA→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的DNA上→表达将含有目的基因的表达载体提纯→取受精卵→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物Ca+处理细胞→微生物细胞膜的通透性增加形成感受态细胞→重组质粒与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子将目的基因导入不同细胞的方法一将目的基因导入受体细胞一小结

核心归纳受体细胞的选择(1)对于植物来说，受体细胞可以是受精卵或体细胞，因为植物细胞具有全能性。(2)对于动物来说，受体细胞一般是受精卵，因为受精卵的全能性高，而高度分化的动物体细胞的全能性受到抑制。(3)大肠杆菌和酵母菌在基因工程中都可以作为受体细胞