肿瘤的分子诊断.pptVIP

脱氧寡核苷酸（oligodeoxyribonucleotide,ODN），也被称为TFO(triplex-formingoligo)肽核酸（peptidenucleicacids，PNA，一种以多肽骨架取代糖-磷酸骨架的DNA类似物）与靶基因的DNA双螺旋分子形成三股螺旋DNA水平3214反基因技术反义基因疗法Targetedinhibitionofgeneexpression转录和翻译水平05使RNA失活04核酶（ribozyme）03反义RNA02导入特定的反义核酸01反义技术核酶催化RNA切割和RNA剪接Recognitionsequences“hammerhead”ribozymesselfsplicingintronribozymes(二)间接策略

导入与致病基因无直接联系的治疗基因其它策略分子化疗免疫基因治疗010203IL-2、IL-4、IL-1、IL-6、IL-7、IL-12、INF-γ、TNF-α、G-CSF、GM-CSF细胞因子基因治疗MHCI类抗原、共刺激分子免疫增强基因疗法癌胚抗原（CEA）制备的肿瘤DNA疫苗肿瘤DNA疫苗疗法贰壹叁1.免疫基因治疗免疫基因治疗TumourNecrosisFactor药物增敏基因治疗：钙调素基因自杀基因疗法：tk基因、CD基因化疗保护性基因治疗：MDR基因2.分子化疗将一些来源于病毒或细菌的基因导入肿瘤细胞该基因表达产生的酶可催化无毒性的药物前体转变为细胞毒性物质，从而杀死肿瘤细胞；同时通过“旁观者效应”（bystandereffect）杀死邻近未导入该基因的分裂细胞而显著扩大杀伤效应。由于携带该基因的受体细胞本身也被杀死，所以这类基因被称为“自杀基因”。(1)自杀基因疗法01单纯疱疹病毒胸苷激酶（HSV-tk）基因02编码胸苷激酶（TK）催化丙氧鸟苷（ganciclovir,GCV）磷酸化成为磷酸化的核苷酸类似物，阻断DNA的合成。03大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶（CD）基因04将5’-氟胞嘧啶（5’-FC）转化为5’-氟尿嘧啶（5’-FU）而发挥细胞毒性作用。05细胞色素P450基因自杀基因viralvector（HSV）thymidinekinasegenetumourcellganciclovirphosphateGanciclovir（GCV）tkTargetedKilling-GeneticPro-drugActivationTherapyCelldeath–IncludingbystandercellsGanciclovirphosphateinhibitsDNApolymerase指将编码抗细胞毒性药物蛋白的基因导入人体细胞，以提高机体耐受肿瘤化疗药物的能力。如将多药抗性（multipledrugresistance,MDR）基因MDR-1导入骨髓造血干细胞，减少骨髓受抑制的程度，以加大化疗剂量，提高化疗效果。(2)化疗保护性基因治疗将外源基因插入肿瘤细胞后，改变肿瘤细胞对药物的敏感性。如将钙调素基因转入癌细胞，利用其对癌细胞MDR的逆转作用，使癌细胞对化疗药物的敏感性明显提高。(3)药物增敏基因治疗特异性细胞杀伤多基因转染3.其它策略特异性细胞杀伤指利用重组DNA技术将生物来源的细胞毒素基因与一些特异受体基因融合，构建融合基因，导入高度表达该受体的肿瘤细胞，以特异性杀伤该肿瘤细胞。01如将绿脓杆菌外毒素（PE）或白喉毒素（DT）基因与TGFα基因组成融合基因TGFα-PE，或TGFα-DT。02由于TGFα与表皮生长因子EGF结构类似，也能与表皮生长因子受体（EGFR）结合；03故该融合基因可特异性进入并杀死高度表达EGFR的膀胱癌、肾癌、肺癌、乳腺癌等肿瘤细胞。特异性细胞杀伤01外源基因的选择与制备02载体的选择与构建03靶细胞的选择04基因转移05基因转染细胞的筛选与鉴定06回输体内三、基因治疗的基本流程0102根据基因导入的方式分为两种：是指在体外将目的基因导入靶细胞，经过筛选和增殖后将细胞回输给患者，使该基因在体内有效地表达相应产物，以达到治疗的目的。直接体内疗法（invivo）是指将目的基因直接导入体内有关的组织器官，使其进入相应的细胞并进行表达。2.间接体内疗法（exvi