灭菌及染菌的防治生.ppt

（二）产生噬菌体的原因通常在工厂投产初期并不感到噬菌体的危害，经过1~2年以后，主要是由于生产和试验过程中不断不加注意地把许多活菌体排放到环境中去，自然界中的噬菌体就在活菌体中大量生长，造成了自然界中噬菌体增殖的好机会。这些噬菌体随着风沙尘土和空气流动传播，以及人们的走动、车辆的往来也携带着噬菌体到处传播，使噬菌体有可能潜入生产的各个环节，尤其是通过空气系统进入种子室、种子罐、发酵罐。第63页,共68页，星期六，2024年，5月在培养皿上倒入培养生产菌的培养基（加琼脂）作下层。同样的培养基中加入20％～30％培养好的种子液，再加入怀疑染噬菌体的发酵液，摇均匀后，铺上层。培养过夜观察培养皿上是否出现噬菌斑。也可以在上层培养基中不加怀疑染噬菌体的发酵液，而将发酵液直接点种在上层培养基表面，培养过夜，观察有无透明圈出现。（三）染噬菌体的检测第64页,共68页，星期六，2024年，5月（四）噬菌体的防治1、必须建立工厂环境清洁卫生制度，定期检查、定期清扫，车间四周有严重污染噬菌体的地方应及时撒石灰或漂白粉。2、车间地面和通往车间的道路尽量采取水泥地面3、种子和发酵工段的操作人员要严格执行无菌操作规程，认真地进行种子保管，不使用本身带有噬菌体的菌种。感染噬菌体的培养物不得带入菌种室、摇瓶间第65页,共68页，星期六，2024年，5月4、认真进行发酵罐、补料系统的灭菌。严格控制逃液和取样分析和洗罐所废弃的菌体。对倒罐所排放的废液应灭菌后才可排放。5、选育抗噬菌体的菌种，或轮换使用菌种。6、发现噬菌体停搅拌、小通风，将发酵液加热到70~800C杀死噬菌体，才可排放。发酵罐周围的管道也必须彻底灭菌。第66页,共68页，星期六，2024年，5月*思考题1.简述灭菌的基本方法？2.简述发酵染菌的原因及防治措施。第67页,共68页，星期六，2024年，5月感谢大家观看第68页,共68页，星期六，2024年，5月*高温灭菌（消毒）法——是最常用的物理方法。高温可引起蛋白质、核酸等活性大分子氧化或变性失活而导致微生物死亡。**微波:通过热产生杀死微生物的作用；紫外线(UV):使DNA分子中相邻的嘧啶形成嘧啶二聚体，抑制DNA复制与转录等功能，杀死微生物；X射线和y射线:使其他物质氧化或产生自由基(OH·、H·)破坏和改变生物大分子的结构，以抑制或杀死微生物。**如有杂菌，可引起以下的后果：

①生产菌和杂菌同时在培养基中生长，结果丧失了生产能力。

②杂菌的生长速度有时比生产菌生长得快，结果使反应器中以杂菌为主。

③杂菌会污染最终产品。

④杂菌所产生的物质，使提取产物时发生困难。

⑤杂菌降解所需要的产物。

⑥发酵如污染了噬菌体，可使生产菌株发生溶菌现象。***发酵对空气无菌程度的要求：一般要求1000次使用周期中只允许有一个菌通过，即经过滤后空气的无菌程度为N=10-3。-空气中微生物(包括细菌、酵母、霉菌和病毒)含量一般为103~104个／米3。一般附着在空气中的灰尘上或雾滴上。-灰尘粒子的平均大小约0.6μm左右，空气除菌主要去除空气中的微粒(0.6~1μm）。**会产生混浊或形成不溶性沉淀（有机沉淀物如多肽类，无机沉淀物如磷酸盐）；改变某些营养成分：1)低pH下，糖类、琼脂发生水解；2）PO4-3存在，葡萄糖生成酮糖，菌不利用；3）色深：还原糖羧基与蛋白质、氨基酸等在高温下发生maillard反应，使糖、蛋白质等失去营养。形成有害物质，抑制微生物生长；pH下降（通常下降0.2）；改变培养基的体积与浓度。**这不是一个概念，一个是压力，一个是压强。在工业中倒是常用，通常1公斤压力表示100KPa也就是说一公斤压力表示一个大气压也可以说1公斤压力等于760mmHg**空气除菌就是除去或杀灭空气中的微生物。常用的除菌方法有介质过滤、辐射、化学药品杀菌、加热、静电吸附等。其中辐射杀菌、化学药品杀菌、干热杀菌等都是将有机体蛋白质变性而破坏其活力，从而杀灭空气中的微生物。而介质过滤和静电吸附方法则是利用分离方法将微生物粒子除去。**高能阴极射线、X射线、γ、β射线、紫外线都能破坏蛋白质活性而起到杀菌作用。其中紫外线用的较多，它在波长226.5nm-328.7nm时杀菌最强。一般用于无菌室、手术室杀菌。静电除尘法已广泛使用，除尘效率一般在85~99%之间，但由于它消耗能量小，每处1000立方米的空气每小时只需电0.2~0.8kw。空气压头损失小，一般只在4~20mm水柱。静电除尘