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无菌操作相关规程

（一）无菌操作概念用于防止微生物进入人体组织或其他无菌范围的操作技术称为无菌操作。在各种生物试验中，为了防止微生物的生长和繁殖影响试验的举行，也要在相对无菌的条件下举行。无菌操作普通需要超净工作台辅助。正常用法时，超净工作台内的空气洁净度级别为A级，因此，只能提供相对无菌的操作环境，要达到无菌的效果，还需要辅助以良好的无菌操作习惯和操作办法。（二）消毒和灭菌有关术语下面是无菌操作中较常用的术语：抗菌剂：能够杀死微生物或抑制它们生长和繁殖的制剂。：能够抑制微生物生长和繁殖但不足将其杀灭的物质。防腐剂常常应用于体表。生物杀灭剂：全部能够杀死生物体的制剂的统称。化学：用于杀死微生物的化学品或化学混合物。清除污染：去除和／或杀死微生物的任何过程。该词也用于去除或中和有危害的化学品和发射性物质。：用于杀死常见病原微生物的化学品或化学混合物，但不一定杀死芽孢。消毒：杀死常见病原微生物的物理或化学手段，但不一定杀死芽孢。灭菌剂：能够杀死微生物的化学品或化学混合物。该词经常可以代替“生物杀灭剂”、“化学杀菌剂”或“抗菌剂”。杀孢子剂：用于杀死微生物和抱子的化学品或化学混合物。灭菌：杀死和／或去除全部微生物及其抱子的过程。（三）常用消毒剂1.70％杀菌效果最好的酒精浓度为70%，考虑到实际用法情况，普通购买75％的商品，即消毒酒精,或用纯水稀释无水乙醇到75％用法。普通分装于喷壶内，用法时以喷雾的形式对物品消毒，再用法整洁纱布擦拭。2．酒精棉球通常用医用脱脂棉自制棉球，或购买成品医用脱脂棉棉球。将该棉球保存于75％酒精中备用，液体量以足够棉球吸附即可。3.0.1％-0.5％新洁尔灭溶液手表面消毒，消毒抹布浸泡，地面消毒时拖把浸泡用法。4．外科手消毒夜用于手部皮肤消毒。二、无菌操作（一）无菌操作办法在执行无菌操作前，必需明确物品存放的无菌区和非无菌区。穿戴好洁净服和帽子、洗手，通过风淋通道进入洁净间。在执行无菌操作前，还需将双手用消毒酒精等消毒剂举行消毒，手上的液体在超净工作台内通过风淋使其干燥。无菌操作中夹取无菌物品时，必需用法无菌持物钳（辅料镊、增竭钳等）。举行无菌操作过程中，凡未经消毒的双手，均不行挺直触碰无菌物品或超越无菌区取物。穿戴防护手套时也需消毒手套表面。无菌物品（培养液、缓冲溶液、试剂、培养板等）必需保存在无菌容器或无菌包内，不行裸露在超净工作台内空气中过久。无菌容器应在无菌包一经打开即不能视为肯定无菌，应尽早用法。无菌物品与非无菌物品应分离放置。凡已取出的无菌物品虽未用法也不行再放回无菌容器内。举行细胞影像等数据采集时，先取出细胞培养板，擦去板外粉尘，在倒置显微镜下镜检时，不能打开培养板的盖子，防止染菌。（二）无菌操作的条件预备与维护在洁净间内用法的洁净工作服，需定期举行清洗、消毒灭菌，用法周期内的工作服需注重防潮、防尘、防污，不用法时应按序摆放整齐。每次用法洁净间后，应用湿拖把拖地一次或用吸尘器吸尘，防止粉尘积累，对环境造成污染。洁净间用法前后，分离用移动紫外消毒车或室内紫外灯对室内空气和仪器表面、实验台台面和地面举行一次消毒。举行无菌操作时，必需正确用法超净工作台。超净工作台在用法前、后均需分离举行消毒剂擦抹除尘和紫外消毒。紫外灯消毒时光30.40min，期间务必开启风淋，关闭照明，最好将超净工作台所在的囫囵洁净间的照明关闭，窗帘拉上，以达到最大的紫外消毒效果。超净工作台台面等维护合理。每次用法后用消毒液浸泡的湿抹布擦抹台面粉尘，长时光不用法超净工作台也应定期用消毒液浸泡的湿抹布擦抹台面粉尘。定期擦抹照明灯管和紫外灯管上可能存在的微尘，以便保证充沛的照明效果和充分的消毒灭菌效果。每次镜检操作前需对倒置显微镜载物台、试验台面用消毒剂擦抹除尘消毒。定期用消毒酒精擦抹CO2培养箱内、外表面，或用法其他方式对CO2培养箱内表面进行消毒。（三）动物细胞培养的无菌操作规程(1)操