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其次章常用试验技术及方法一、聚合酶链反响(PolymeraseChainReaction,PCR)反响总体积为50μl,其中含有:
模板DNA 0.5μl
PCR缓冲液(不含MgCl2) 5μl
10×MgCl2溶液 5μl
dNTP(2.5mmol/L) 0.5μl
引物1(50umol/L) 0.5μl
引物2(50umol/L) 0.5μl
TaqDNA聚合酶 0.5μl
无菌去离子水加至 50μl
上层用25μl液体石蜡油掩盖。
循环参数为: 94℃变性10min94℃变性1min
56℃退火1min
72℃
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