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2006年《分子生物学试验技术》试验内容
一、RT-PCR
〔一〕总RNA的提取
试验安排:
每两人抽提一管。为了使操作同步以节约时间,各组样品请一起离心。
操作步骤:
1、将100μl液体样品参加1.5mlEp管中,再参加900μl冰预冷的LS-BiotragentsTM〔苯酚和异硫氰酸胍的混合物〕。
2、将样品猛烈混合后,在室温放置5min。
3、参加200μl氯仿,颠倒Ep管混和两次,并猛烈振荡混和10s。
4、在4℃条件下,以10000×g离心15min。
5、将上层水相转移到一个的Ep管中,参加等体积的异丙醇〔Isopropanol〕并混匀,
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