斑玉蕈菌种生产技术规程.docxVIP

2

斑玉蕈菌种生产技术规程

1范围

本文件规定了斑玉蕈固体和液体菌种生产条件、生产技术、抽样、检测、贮存以及生产记录等内容。本文件适用于斑玉蕈固体和液体菌种的生产。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB5749生活饮用水卫生标准

GB/T12728食用菌术语

GB4789.28食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求

GB4806.7食品安全国家标准食品接触用塑料材料及制品

GB50073洁净厂房设计规范

NY/T391绿色食品产地环境质量

NY/T528食用菌菌种生产技术规程

NY1731食用菌菌种良好作业规范

3术语和定义

GB/T12728和NY/T528界定的以及下列术语和定义适用于本文件。

3.1

斑玉蕈Hypsizygusmarmoreus(Peck)H.E.Bigelow

又名真姬菇，商品名海鲜菇、蟹味菇、白玉菇等，隶属于担子菌门、伞菌纲、伞菌目、离褶伞科、玉蕈属真菌。子实体丛生，菌盖肉质，初为半球形，灰褐色，盖中央色稍深，有网状龟裂纹，边缘光滑。菌肉淡白色。菌柄白色，空心，骨质脆，中下部膨大。孢子无色，卵形有喙，表面光滑，无纹饰。

4生产要求

4.1生产条件

4.1.1人员要求

具有食用菌菌种生产或检验的从业资格人员。

4.1.2场地选择

菌种生产场地应符合NY/T528规定，生产环境应符合NY1731，生产用水应符合GB5749。

4.1.3生产设施与设备

3

满足食用菌菌种生产的基本需要，布局合理，规模配套，符合NY/T528规定。接种室、培养室按照GB50073规定执行。部分场所设施设备应达到如下要求：

a)接种室、固体培养室、液体培养室配备调温设施；

b)接种室、固体培养室空间洁净度达到万级；液体培养室空间洁净度达到十万级；c)化验室和菌种保藏室具备相应实验检测设备和灭菌设施及常规用具。

4.1.4原料

所用原料符合NY/T528要求。液体菌种生产所需生物制剂和天然材料的水不溶性固体物料小于40目。

4.1.5生产品种

选用经省级以上农作物品种审定委员会审（认）顶或登记（备案），优质、高产、稳定、抗逆性强、商品性号的斑玉蕈品种。从具备相应资质的单位引种。

5生产技术

5.1母种制备

5.1.1培养基配方

马铃薯（去皮煮汁）200g，葡萄糖20g，蛋白胨1g，磷酸二氢钾0.5g，硫酸镁0.5g，琼脂粉18~20g，水定容至1000mL，pH自然。

5.1.2菌种接种与培养

母种固体培养按照NY/T528中规定的PDA培养基配方进行制备。

5.2摇瓶菌种制备

5.2.1培养基配方

马铃薯（去皮煮汁）200g煮汁，葡萄糖20g，水定容至1000mL，pH自然。

5.2.2分装

使用500mL耐121℃高温的无色玻璃三角瓶，装液量为三角瓶容积的1/3~3/5，放入直径3mm~4mm的玻璃珠5粒~8粒，使用棉塞、硅胶塞或透气滤膜封瓶口。

5.2.3高压灭菌

使用牛皮纸封住分装好的三角瓶瓶口，将三角瓶装入高压蒸汽灭菌锅，在121℃条件下灭菌30min。灭菌完毕后自然降压，温度降至70℃以下取出培养基移至接种室。

5.2.4接种

培养基冷却至20℃~25℃时接种。无菌条件下，使用经火焰灼烧灭菌并冷却至室温的接种针挑取8块~10块30mm3~40mm3的母种菌块，迅速转接入摇瓶培养基中，封好瓶口，接种完成后贴好标签。

5.2.5恒温培养

4

5.2.5.1培养室消毒

培养室使用前2d采用臭氧发生器消毒或紫外灯消毒，并用75%酒精擦拭恒温培养箱和恒温震荡摇床。

5.2.5.2培养条件

将三角瓶放入25℃恒温箱中静置培养1d，然后置于恒温摇床上培养，温度控制在23℃±2℃,,转速140rpm~160rpm，培养时间8d~10d。

5.3固体菌种生产

枝条菌种是目前广泛应用的固体菌种，由杨木等软质树种加工成枝条，菌丝长入枝条后作为菌种。

5.3.1枝条浸泡

将枝条浸泡在石灰水中，待水分充分渗入枝条中心后可以使用，防止“夹干”导致灭菌不彻底。

5.3.2制作木屑料

木屑45%~50%，玉米芯25%~29%，麦麸18%~20%，石灰0.5%~1.0%，含量量63%~65%，pH6.0~6.5。

5.3.3装袋

将塑料袋装入适量木屑料，避免枝条刺破袋底，再加入枝条，撒上木屑料，