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180中国学术期刊文摘(中文版)2007年13卷第9期

峰，袁建军，王桂忠，田蕴，郑天凌，／蛋白(GP)双表达重组质粒，在中国仓鼠研究重组人干扰素2a(rhIFN2a)凝胶

厦门大学学报(自然科学版)．—20o6，卵巢细胞(CHO．K1)中表达核蛋白和糖对动物体内单纯疱疹病毒(HSV)感染的

45(6)．一841～846蛋白．提取狂犬病毒RNA，应用RT．PCR疗效．建立HSV．1型豚鼠皮肤感染模型

传统的微生物分离与培养技术无法揭示方法扩增NP和GP基因，分别将其克隆和HSV一2型小鼠阴道炎模型，考察

微生物群落的动态变化．为了阐释虾池到plRES载体上，获得同时含有NP和rhIFN2a凝胶抗HSV作用．将模型豚

沉积环境微生态格局的原始组成情况，GP基因的双顺反子重组质粒pING，并鼠与小鼠各自分为3个试验组，分别用

研究先以TENP缓冲液去除沉积物中的以脂质体介导法转染CH0．K1细胞，3X10、2×10和1X10IU／g的rhIFN

腐殖酸，继之以溶菌酶一SDS温和裂解，G418筛选，用ELISA和IFA检测NP2a凝胶治疗，并设平行对照(阿昔洛韦)

其总DNA的提取效率达90％以上，所和GP的表达．限制性内切酶分析表明与空白对照(未治疗)组．评价各组的疗

获DNA产量达2～20~,gg／沉积物(湿)，重组质粒pNIG含有NP和GP基因片段，效．与空白对照组比较，rhlFN2a凝

片段大小均在23kb左右，不经纯化即长度分别为1353bp和1575bp．应用胶2X10和3X10IU／g剂量组可明显

可直接进行PCR扩增和限制性酶切．以ELISA和IFA方法，在转染细胞中均检减少豚鼠皮肤组织中病毒含量，降低小

该DNA为模板进行PCR．DGGE分析，测到NP和GP的表达．重组双表达质粒鼠的死亡率，延长生存期．rhIFN2a

揭示了虾池沉积物丰富的微生物多样可在CHO细胞中同时表达NP和GP，凝胶与阿昔洛韦的疗效差异无显著意

性．该方法是一种适用于虾池沉积物总为进一步开发重组狂犬病疫苗奠定了基义．rhIFN2a凝胶具有抑制HSV一1致

DNA提取的简便、可靠方法．图6表3础．图4表1参11皮肤病变作用，可缩短病程，对HSV．2

参13关键词：狂犬病毒；糖蛋白；核蛋白；所致小鼠阴道炎有较好疗效．表3参7

关键词：虾池：DNA提取；PCR；限制双表达；真核细胞关键词：干扰素凝胶；单纯疱疹病毒；

酶切；DGGE180·46疗效；动物模型

180·61表达PRRSVGP5、GP3和猪一18的重o7091152180·71生物工程

表达MAGE一1／HSP70／MAGE一3工程菌组鸡痘病毒的构建及鉴定：Construc—超临界CO2萃取蚕蛹油的工艺研究：

的稳定性：StabilityofrecombinanttionnadidentificationofrecombinnatSupercriticalCO2ex~actionofoilfrom

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