大肠杆菌的培养和分离.pptVIP

第一区域第二区域第三区域第四区域第五区域无忧PPT整理发布无忧PPT整理发布无忧PPT整理发布无忧PPT整理发布无忧PPT整理发布无忧PPT整理发布**实验1：大肠杆菌的培养和分离微生物放线菌单细胞原核，分支状的菌丝（基内~、气生~）芽孢：细菌的休眠体芽孢大肠杆菌物质(元素)组成：CHONPS…3结构1异养型，兼性厌氧型，革兰氏阴性(红色)(G-)2培养基类型按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。凝固剂琼脂扩大培养，工业生产分离纯化，鉴定菌种，计数，保藏选择培养基鉴定培养基天然培养基合成培养基培养基成分成分作用主要来源碳源主要作能源物质无机碳(CO2)或有机碳(糖类)氮源合成含N类化合物N2，NH3，铵，硝酸盐尿素，牛肉膏，蛋白胨无机盐调节渗透压等水生长因子调节促生长维生素，AA，碱基等消毒：较为温和的方法，如酒精1注：消毒不能杀死芽孢2灭菌：强烈，所有，完全无菌3灭菌消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。4无菌技术煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或80℃下煮15min（牛奶）化学药剂消毒法:用70%酒精进行皮肤消毒;氯气消毒水源紫外线消毒（空气）01常用消毒的方法：02(2)常用灭菌的方法：1、灼烧灭菌2、干热灭菌：160-170℃下加热1-2h。3、高压蒸汽灭菌：100kPa、121℃下维持15-30min.步骤一：制备LB培养基(液)称量-计算-溶化-灭菌-倒平板01灭菌：加上封口膜，用牛皮纸包好放在高压蒸汽灭菌锅中灭菌，1Kg压力灭菌15Min02左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养基倒入培养皿，立刻盖上皿盖在火焰旁右手3指拿锥形瓶，2指拿封口膜使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置紫外灯，过滤风，酒精灯，酒精棉球倒平板过程总结步骤二：大肠杆菌的扩大培养从大肠杆菌斜面→锥形瓶中的液体培养基01接种好后在37度摇床振荡培养12h02工具：接种环在接种前要灭菌03分离方法：平板划线分离法原理：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。只能蘸一次、再次划线从上次末端开始、划好倒置培养1-2天、划线末端出现不连续的单个菌落步骤三：大肠杆菌的分离纯化平板划线接种灼烧接种环冷却划线（第一区域）蘸取菌液灼烧接种环冷却划线（第二区域）灼烧接种环冷却划线（第三区域）灼烧接种环冷却划线（第四区域）灼烧接种环冷却划线（第五区域）灼烧接种环平板倒置放置培养无忧PPT整理发布无忧PPT整理发布无忧PPT整理发布无忧PPT整理发布无忧PPT整理发布无忧PPT整理发布**