生物化学检验技术 课件 第十三章 肾功能及早期肾损伤检验.pptx

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职业教育医学检验技术专业教学资源库;;;第一节概述

;;1.肾脏的解剖学结构;(二)肾的基本功能;;;;1/29/2020;1.肾的泌尿功能

(3)肾小管与集合管分泌;尿液生成的三个步骤;2.肾的内分泌功能;二、肾疾病时功能变化特点;;;;;(一)肌氨酸氧化酶法;(一)肌氨酸氧化酶法;;【方法学评价】

1.血清中的某些物质如蛋白质、葡萄糖、维生素C、丙酮、乙酰乙酸、丙酮酸,胍和头孢菌类抗生素等亦可与苦味酸产生同样的反应,这些物质称为假肌酐

2.线性范围2000μmol/L。回收率为96.7%~100.4%,平均98.5%

3.苦味酸速率法为IFCC推荐方法,可采用双波长(510nm,600nm)监测

【参考区间】男性:62-115μmol/L

女性:53-97μmol/L

;见于各种肾病、急性或慢性肾衰竭、重度充血性心力衰竭、心肌炎、肌肉损伤、巨人症、肢端肥大症等。

在肾脏疾病初期,血清肌酐值通常不升高,肾小球滤过率下降到正常人的1/3时,血肌酐才明显上升,是反映GRF减退的后期指标。

在正常肾脏血流量的条件下,肌酐值如升高至176~353μmol/L,提示为中度至严重的肾损害。

所以,血肌酐测定对晚期肾脏疾病的临床意义较大。而非肾源性血肌酐浓度的增高一般不超过200μmol/L

下降见于进行性肌肉萎缩、白血病、贫血、肝功能障碍及妊娠等

;;(一)尿酸酶-过氧化物酶偶联法;(一)尿酸酶-过氧化物酶偶联法;【方法学评价】

1.特异性和干扰该法灵敏且不需要去蛋白,尿酸酶对尿酸催化的特异性高,但POD催化反应特异性较差,主要干扰物质是维生素C和胆红素,对测定尿酸有负干扰。在反应体系中加入维生素C氧化酶和胆红素氧化酶,可以消除干扰

2.尿酸浓度在178.6-713.8μmol/L范围内线性良好,回收率94.6%-102.3%;批内和批间CV在224.8μmol/L和792.8μmol/L时均小于5%

3.溶血标本不可用。血清标本室温下可稳定3天

【参考区间】男性:208-428μmol/L

女性:155-357μmol/L;(二)磷钨酸还原法;【方法学评价】

1.特异性和干扰血液中许多非尿酸还原性物质可造成尿酸假性增高,如葡萄糖、谷胱甘肽、维生素C、半胱氨酸、色氨酸、酪氨酸等,这些非尿酸还原物质能使结果偏高17.8~29.3μmol/L。应避免溶血

2.准确度在沉淀蛋白???加入尿酸标准液,其回收率为96%~102%。标准液在150~600μmol/L,测定值与真值的相关系数为0.9999

3.此法灵敏度较低,特异性不高,且显色不稳定,目前不作为血清尿酸测定的主要方法

【参考区间】男性:262-452μmol/L

女性:137-393μmol/L;;;尿素在脲酶催化下,水解生成氨和二氧化碳。氨在α-酮戊二酸和NADH存在下,经谷氨酸脱氢酶(GLDH)催化,生成谷氨酸。同时,NADH+H+被氧化成NAD+,可在340nm波长处监测吸光度下降的速率,计算样本中尿素的含量;(一)酶偶联速率法;;【方法学评价】

1.干扰因素用单一试剂型试剂测定尿素时存在内源性NH3、丙酮酸和外源性NH3的干扰,使测定结果产生正误差。采用双试剂法可消除样品中所含NH3的影响。标本应避免溶血

2.准确度和灵敏度本法批内CV0.78%,批间CV2.94%;回收率93.0%~105.3%,线性上限为17.85mmol/L。多适用于自动生化分析仪测定,但试剂较贵

3.此法为IFCC(国际化学联合会)推荐方法,可采用双波长(340nm,700nm)监测

【参考区间】

健康成年人血清尿素浓度:2.9~8.2mmol/L

尿液尿素含量:357~535mmol/24h;尿素在脲酶催化下,水解生成氨和二氧化碳。氨和酚及次氯酸盐在碱性环境中作用形成对-醌氯亚胺;对-醌氯亚胺与另1分子酚作用,形成吲哚酚,它在碱性溶液中产生蓝色的解离型吲哚酚。蓝色吲哚酚的生成量与尿素含量成正比,在560nm波长测定;在酸性反应环境中加热,尿素与二乙酰缩合,生成色原二嗪,称为Fearon反应,540nm处有吸收峰。因为二乙酰不稳定,通常由反应系统中二乙酰一肟与强酸作用,产生二乙酰。二乙酰和尿素反应,缩合生成红色的二嗪化合物;;血清尿素测定;;;一、尿微量清蛋白测定

;亦称HC蛋白(heterogeneousincharge,或humancomplexforming);;46;1.尿液ɑ1-M升高是反映早期肾近端小管损伤的非常

特异和灵敏的指标;2.血清ɑ1-M升高提示肾小球滤过率降低。;3.严重肝实质性病变(如重症肝炎、肝坏死等)

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