DB43T 1824-2020 蔬菜作物辣椒褪绿病毒检测技术规程.docxVIP

ICS65.020B16

DB43

湖南省地方标准

DB43/T18242020

蔬菜作物辣椒褪绿病毒检测技术规程

TcchnicalRegulationforDetectionofcapsicumchlorosisorthotospovirusinvegetables

2020-08-25发布2020-11-25实施

湖南省市场监督管理局发布

DB43/T18242020

目次

前言 III

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

3.1辣椒褪绿病毒 1

3.2反转录-聚合酶链式反应 1

3.3双抗体夹心酶联免疫吸附法 1

3.4阳性对照 1

3.5阴性对照 1

3.6空白对照 1

4仪器和耗材 2

5样品要求 2

5.1样品采集 2

5.2样品处理 2

6检测方法 2

6.1反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法 2

6.2双抗体夹心酶联免疫吸附法(DAS-ELISA)检测方法 3

7检测结果判定 3

附录A(规范性附录)反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法 5

附录B(规范性附录)双抗体夹心酶联免疫吸附法(DAS-EBLISA)检测方法 9

DB43/T18242020

前言

本标准按照GB/T1.12009给出的规则起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由湖南省农业农村厅提出。

本标准由湖南省农业标准化技术委员会归口。

本标准起草单位:湖南省植物保护研究所、湖南省蔬菜研究所、临澧县农技推广中心、保靖县农业农村局、新化县植保植检站、东北农业大学、益阳市资阳区植保植检站、津市市植保植检站、桃源县植保植检站。

本标准主要起草人:孙书娥、张德咏、刘勇、张战泓、刘桂平、王俊华、程晓非、廖基常、张益夫、马家湘、裴艳、朱春晖、成飞雪、程菊娥、谭新球、张卓、张松柏、史晓斌。

DB43/T18242020

蔬菜作物辣椒褪绿病毒检测技术规程

1范围

本标准规定了蔬菜作物辣椒褪绿病毒(capsicumchlorosisorthotospovirls,cacv)检测技术规程的术语和定义、仪器和耗材、样品要求、检测方法、检测结果及结果判定等内容。

本标准适用于蔬菜作物辣椒褪绿病毒的检测和鉴定。

2规范性引用文件

下列文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本标准。

GB6682分析实验室用水规格和试验方法

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

辣椒褪绿病毒capsicumchlorosisorthotospoviruscacv

该病毒是布尼亚病毒科(Bunyaviridae)orthotospovirls病毒属的一个暂定种。在番茄叶片上可引起芽坏死,果实上引起坏死环斑;辣椒叶片上可引起褪绿、坏死环斑,顶端坏死,叶片畸形;西葫芦叶

片上可引起花叶、畸形,果实上引起褪绿、凹凸不平。3.2

反转录-聚合酶链式反应ReverseTranscriptase-polymerasechainReactionRT-PCR

在反转录酶作用下将mRNA反转录成CDNA,再利用PCR以CDNA为模板,扩增合成目的片段的方法。3.3

双抗体夹心酶联免疫吸附法DoubleAntibodysandwichEnzymeLinkedImmunosorbentAssayDAS-ELISA

先将待检测样品进行提取后,加入已被cac