《体细胞免疫治疗》.ppt

肿瘤的体细胞免疫治疗;生物治疗概念

应用生物大分子（细胞、核酸、蛋白质或多肽）或调节生物反应的小分子化合物来治疗肿瘤。生物治疗的基本特点是肿瘤特异性，其机理是干扰肿瘤的生长、分化、凋亡、侵袭、转移和血管生成，调节人体的抗肿瘤免疫反应等。;细胞因子治疗：如干扰素、白细胞介素、肿瘤坏死因子等；

非细胞毒性小分子化合物治疗：如维甲酸、吉非替尼、索拉非尼等；

免疫效应细胞治疗：如CTL细胞治疗、CIK细胞治疗、NK细胞治疗等；

单克隆抗体治疗：如曲妥珠单抗、利妥昔单抗、西妥昔单抗、贝伐单抗/等；

免疫刺激剂治疗：如肿瘤细胞疫苗、树突状细胞疫苗、蛋白质疫苗、卡介苗等；

基因治疗；

;体细胞免疫治疗;免疫效应细胞免疫治疗，如肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）、细胞毒性T淋巴细胞（CTL）、淋巴因子激活的杀伤细胞（LAK）、细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）、自然杀伤细胞（NK）等

树突状细胞（DC）免疫治疗

自体肿瘤抗原修饰的体细胞治疗;体细胞免疫治疗适应症;适应症：;;不良反应：;我国体细胞免疫治疗相关法规;肿瘤体细胞免疫治疗的临床应用;树突状细胞（DC）源自骨髓中的前体细胞，是已知机体内抗原呈递能力最强的细胞，它能在机体内外捕获抗原后，将信息传递给T、B淋巴细胞，从而引发一系列的特异性免疫应答反应。但该种细胞在机体内含量极低，占正常人外周血白细胞的1％左右。

近年来，体外培养DC获得成功，为其功能及分化状态的深入研究和在肿瘤生物治疗领域中的应用创造了条件。因具有长长的树突状突起和星状多形性而得名。;DendriticCells;人成熟DC的扫描电镜图;;人成熟DC表型的流式细胞检测

（可见CD80,CD83，CD86高表达）

;DC肿瘤疫苗制备和临床应用流程;国家发明专利---人肿瘤细胞的分离纯化方法;从术后肾癌组织中分离纯化肾癌细胞

;从术后卵巢癌组织中分离纯化卵巢癌细胞;从术后乳腺癌组织中分离纯化乳腺癌细胞;从术后结肠癌组织中分离纯化结肠癌细胞;树突状细胞疫苗在实体瘤治疗中的策略;

2.CIK细胞;CIK（培养第2天）;CIK（培养第9天）;;自体CIK细胞的治疗策略;3.自然杀伤细胞（NKcells）;;自体NK细胞的治疗策略;4.自体DC细胞激活的CIK细胞;自体DC-CIK细胞的制备;自体DC-CIK在恶性肿瘤治疗中的策略;5.自体DC细胞激活的T淋巴细胞（DC-T）;自体DC-T淋巴细胞在恶性肿瘤治疗中的策略;体细胞免疫治疗在临床肿瘤治疗中的作用;临床上如何来选择细胞治疗方案？;免疫效应细胞培养注意事项

（1）采血时段：

以血常规检测结果确定

白细胞总数：达到3×109/L以上

淋巴细胞总数：达到0.6×109/L以上

凝血功能：凝血酶原活动度(PTA)50%，血小板（PLT）50×109/L

没有明显的贫血：血红蛋白80g/L

满足已上基本条件采血可保证患者的安全和培养过程中细胞扩增的数量。;（2）采血量：

;（3）培养方法

CIK细胞培养：参考（SchmidtWolf,etal.J.Exp.Med.,1991,174:139-149）的方法进行培养

DC-CIK细胞培养：参考（MartenA.,etal.haematologica,2001;86:1029-1037）的方法进行细胞培养

（4）细胞培养过程中培养液的更换次数

根据细胞密度保持在2×106/ml，如果培养到1×1010总数，总共至少需要3L无血清培养液。实际情况根据细胞的扩增速度以及扩增总数来确定更换培养液的量，一般情况下每2天就应补充一次培养液，但每天要观察一次细胞生长的情况。建议培养细胞所用的培养液在3L以上。;（5）免疫效应细胞在体外的培养天数;免疫效应细胞在不同培养天数CD3表型细胞数量变化;CIK、DC-CIK细胞在不同培养天数CD3CD4表型细胞数量变化;CIK、DC-CIK细胞在不同培养天数CD3CD8表型细胞数量变化;CIK、DC-CIK细胞在不同培养天数CD56表型细胞数量变化;CIK、DC-CIK细胞在不同培养天数CD3CD56表型细胞数量变化;CIK、DC-CIK细胞培养到14-21天时，细胞增殖速率达到高峰；

从表型上，CIK细胞培养到14-21天，CD3CD8细胞比例达到70%，CD56达到19%，CD3CD56达到15%；DC-CIK培养到14-21天，CD3CD8细胞比例达到56%、CD56达到30%、CD3CD56比例达到13%，此时细胞组成比较合理；

对肿瘤细胞杀伤上，CIK、DC-CIK培养到14天，对肝癌细胞系HepG2、肺癌细胞系A549、肾癌细胞系ACHN杀伤活性最高，此后开始下降。

综合考虑CIK、