生物化学第二章蛋白质的结构与功能.ppt

蛋白质的胶体性质蛋白质的超速离心利用机械快速旋转所产生的离心力将不同密度的蛋白质分离开来其沉降系数与蛋白质的分子量、密度、排列的紧密程度等有关第117页,共132页，星期六，2024年，5月第118页,共132页，星期六，2024年，5月第119页,共132页，星期六，2024年，5月第120页,共132页，星期六，2024年，5月第121页,共132页，星期六，2024年，5月蛋白质分子相互聚集而从溶液中析出的现象称为沉淀（precipitation）。蛋白质的沉淀变性后的蛋白质由于疏水基团的暴露而易于沉淀，但沉淀的蛋白质不一定都是变性后的蛋白质。第122页,共132页，星期六，2024年，5月蛋白质的沉淀

—沉淀方法

盐析法：中和表面电荷并破坏水化膜；一般不会导致变性有机溶剂沉淀法：一般引起蛋白质变性重金属盐沉淀法：应用临床重金属解毒生物碱试剂和某些酸沉淀法：用于临床检验部门去除体液中干扰测定的蛋白质第123页,共132页，星期六，2024年，5月蛋白质的凝固加热使蛋白质变性并凝聚成块状称为凝固（coagulation）。因此，凝固的蛋白质一定发生变性。第124页,共132页，星期六，2024年，5月蛋白质的呈色反应1．茚三酮反应：氨基酸的游离?-氨基可与茚三酮缩合产生蓝紫色化合物（脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应产生黄色物质），其最大吸收峰在570nm。可利用此性质测定氨基酸的含量。第125页,共132页，星期六，2024年，5月蛋白质的呈色反应2、双缩脲反应：在弱碱溶液中，蛋白质分子中的肽键与硫酸铜共热生成紫色或红色络合物的反应。可用于检测蛋白质的水解程度3、Folin酚试剂呈色反应：蛋白质分子中酪氨酸残基上的酚可以在碱性条件下与磷钨酸、磷钼酸盐反应生成蓝色化合物，在540nm波长处，该蓝色化合物的光密度大小与蛋白质含量成正比，此方法特异性强、灵敏度高，是临床普遍使用的蛋白质定量测定方法。第126页,共132页，星期六，2024年，5月色氨酸和酪氨酸含共轭双键其在波长280nm左右有最大吸收峰，以色氨酸吸收最强。大多数蛋白质都含有这两种氨基酸残基，因此，可利用此性质采用紫外分光光度法测定蛋白质的含量。2．紫外吸收性质：第127页,共132页，星期六，2024年，5月第四节蛋白质的分类第128页,共132页，星期六，2024年，5月第129页,共132页，星期六，2024年，5月第130页,共132页，星期六，2024年，5月按功能分类:活性蛋白质:酶激素非活性蛋白质:角蛋白胶原蛋白第131页,共132页，星期六，2024年，5月*感谢大家观看第132页,共132页，星期六，2024年，5月****************************（二）三级结构定义：蛋白质的多肽链在各种二级结构的基础上再进一步盘曲或折叠形成具有一定规律的三维空间结构，称为蛋白质的三级结构。作用力：次级键（副键），包括氢键、离子键、疏水键、盐键以及范德华力等。第85页,共132页，星期六，2024年，5月第86页,共132页，星期六，2024年，5月第87页,共132页，星期六，2024年，5月第88页,共132页，星期六，2024年，5月肌红蛋白N端C端三级结构对于蛋白质的分子形状及其功能活性部位的形成起重要作用。第89页,共132页，星期六，2024年，5月第90页,共132页，星期六，2024年，5月第91页,共132页，星期六，2024年，5月第92页,共132页，星期六，2024年，5月含10个以下亚基的蛋白质分子称为寡聚体10个以上的称为多聚体由相同亚基构成的多聚体称为同源多聚体，不同亚基构成则称为异源多聚体第93页,共132页，星期六，2024年，5月第94页,共132页，星期六，2024年，5月血红蛋白（Hb）只有完整的四级结构才具有生物活性。第95页,共132页，星期六，2024年，5月三蛋白质结构与功能的关系蛋白质的结构与功能的关系密切，结构是功能的基础，功能是结构的体现。第96页,共132页，星期六，2024年，5月第97页,共132页，星期六，2024年，5月第98页,共132页，星期六，2024年，5月一级结构→空间构象→功能1.一级结构中“关键”部分相同,其功能相同。如：不同动物来源的胰岛素用于治疗人的糖尿病2、一级结构中“关键”部分变化,其功能