生物制品分析概论医学.pptVIP

测定方法：1分子杂交技术2基于DNA结合蛋白分析系统3实时定量PCR方法4（二）外源性DNA残留量的检查生物制品在生产制造、分离纯化和贮藏保存过程中产生的与产品结构类似的同系物、异构体、突变物、氧化物、聚合体或降解物。12如重组人生长激素中相关蛋白质的测定总相关蛋白质含量不超过10%。3常用HPLC法和电泳法。（三）产品相关杂质检查如果生物制品在生产过程中使用了抗生素，则不仅要在纯化工艺中除去，而且要在原液检定中增加残余抗生素活性的检测方法。常用方法：抑菌圈测量。结果判定：对照溶液有抑菌圈，阴性对照无抑菌圈，供试品溶液抑菌圈的直径小于对照溶液抑菌圈的直径时判断为阴性；否则为阳性。（四）残余抗生素的检查二、安全性检查热原检查法和细菌内毒素检查法异常毒性检查过敏试验检查异性蛋白降压试验检查组胺、类组胺或其他导致血压下降的物质无菌试验检查药品及敷料是否有活菌的一种方法含量测定HPLCSDS效价测定含量（效价）测定理化分析法01.生化分析法01.生物检定法01.常用的定量分析方法及应用化学分析方法电化学分析法光谱分析法色谱分析法重量法容量分析法理化分析法比色法利用样品与显色剂发生现色反应，根据反应产物的颜色强度来测定含量。Elson-Morgan硫酸软骨素的比色法测定：在酸性条件下使样品水解成氨基己糖，再在碱性条件下与乙酰丙酮和二甲氨基苯甲醛反应生成红色的产物，该产物在525nm处有最大吸收。光谱分析方法具体试验操作：1、制备对照品溶液－盐酸氨基葡萄糖2、制备供试品溶液－硫酸软骨素3、反应和测定－缩合反应和比色测定A平为供试品溶液的吸收度As平为对照品溶液的吸收度Ws为对照品溶液的浓度（mg/ml）W为称样量（mg）0.8309为校正因子500为稀释倍数以氨基葡萄糖计≥24.0％1反相高效液相色谱法RP-HPLCReversed-phasehigh-performanceliquidchromatography2高效离子交换色谱法HPIECHigh-performanceIon-exchangechromatography3高效凝胶过滤色谱法HPGFCHigh-performanceGel-filterchromatography高效液相色谱法基本原理：利用ODS或C18等极性较小的键合硅胶为填料，以极性较大的methanol-water、CH3CN-H2O为流动相，根据样品在固定相和流动相中的不同保留行为而实现高效分离的一种方法。可以应用UV、DAD、FD、ELSD、ECD、MS等作为检测器，分离化合物范围广泛。反相高效液相色谱法生白能（重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子）的RP-HPLC测定色谱条件色谱柱：TSKODS-120T(150×4.6mm,I.D.,5μm)流动相:（A）0.1％的三氟乙酸,（B）乙腈－1％三氟乙酸（90：10），梯度洗脱检测波长：214nm柱温：室温流速：1.0ml/min生白能的HPLC图添加剂(人血白蛋白）重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子（GM-CSF)根据生物药物的分子量及其极性来对成分进行分离测定，主要用于生化药物的分离和分子量的测定研究。分离产物可以回收、可以用少量表面活性剂来改善分离效果、可根据化合物的形状和分子量大小来预测出峰顺序。具有简便、快速、重现性好、样品用量少等优点。高效凝胶过滤色谱法《药物分析》课件第十三章

生物制品分析概论基本要求掌握：常用的定量分析方法中的色谱分析法。熟悉:该类药物的质量检验的基本程序与方法。了解：生化药物和基因工程药物定义、种类和特点。基本内容一、概述二、鉴别试验三、杂质检查四、含量（效价）测定练习与思考生物制品药物分析有那些特点？为什么必须对生物制品进行全程质量控制？问题生物制品42005年版药典分为几部？每部的收载内容？5生物药物（来源和生产方法）1生化药物2生物合成药物3第一节概述生物药物利用生物体、生物组织或组成生物体的各种成分，综合运用生物学、生物化学、微生物学、免疫学、物理化学和药学的原理与方法制得的一大类药物。第一代：利用生物材料加工制成的含有某些天然活性物质与混合成分的粗提取物制剂：鱼肝油、胰酶及其肠溶、甲状腺粉及其制剂等。01第二代：根据生物化学和免疫学原理，应用近代生化分离纯化技术从生物体制取的具有针对性治疗作用的特异生化成分。如：尿激酶、胰岛素、人血白蛋白等。02第三代：应用生物工程技术生产的天然生理活性物质，以及通过蛋白质工程原理设计制造的具有比天然物质