王不留行炮制前后的UPLC指纹图谱比较及刺桐碱和王不留行黄酮苷的含量测定.pdfVIP

王不留行炮制前后的UPLC指纹图谱比较及

刺桐碱和王不留行黄酮苷的含量测定

作者：曹斯琼吴文平罗宇琴马瑞瑞潘礼业李国卫陈向东

来源：《中国药房》2020年第19期

摘要目的：比較王不留行炮制（清炒）前后的指纹图谱差异，并测定其炒制前后刺桐

碱、王不留行黄酮苷的含量。方法：采用超高效液相色谱（UPLC）法，色谱柱为YMCTrait

C18，流动相为乙腈-水（梯度洗脱），流速为0.35mL/min，检测波长为219nm，柱温为

35℃，进样量为1μL。以王不留行黄酮苷为参照，绘制王不留行生品及其炮制品（各17批，

编号分别为S1～S17、CS18～CS34）的指纹图谱;采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统

（2012版）》进行相似度评价及共有峰指认;采用SPSS20.0软件进行聚类分析、主成分分析

和因子分析。采用上述UPLC法测定王不留行生品及其炮制品中刺桐碱、王不留行黄酮苷的含

量。结果：17批王不留行生品及其炮制品的UPLC指纹图谱中均有共有峰5个，相似度均大

于0.99;共指认了刺桐碱和王不留行黄酮苷等2个共有峰。聚类分析结果显示，S1～S17聚为一

类，CS18～CS34聚为一类;主成分分析及因子分析结果显示，第1主成分的方差贡献率为

76.418%，刺桐碱、王不留行黄酮苷在第1主成分上有较高载荷（特征值分别为0.976、

0.966）。刺桐碱、王不留行黄酮苷检测质量浓度的线性范围分别为6.437～321.832、7.729～

386.437μg/mL（r均大于0.999）;检测限、定量限分别为0.085、0.284ng（生品）和0.739、

2.465ng（炮制品）;精密度、重复性、稳定性（12h）、耐用性试验的RSD均小于3%（n=6

或n=5）;平均加样回收率分别为96.42%（RSD=0.85%，n=6）、99.13%（RSD=1.74%，

n=6）。两种成分的含量分别为0.11%～0.20%、0.42%～0.63%（生品）和0.08%～0.11%、

0.34%～0.50%（炮制品）。结论：成功建立了王不留行生品及其炮制品的UPLC指纹图谱。

王不留行炒制前后的化学成分虽一致性较好，但炒制后刺桐碱、王不留行黄酮苷的含量均有所

降低。

关键词王不留行;炮制;超高效液相色谱法;指纹图谱;刺桐碱;王不留行黄酮苷;聚类分析;主

成分分析

ABSTRACTOBJECTIVE：ComparethefingerprintdifferenceofVaccariaeSemenbeforeand

afterprocessed（stir-fried），andtodeterminethecontentsoferythrineandvaccarinbeforeand

afterstir-fried.METHODS：UPLCmethodwasadopted.ThedeterminationwasperformedonYMC

TraitC18columnwithmobilephaseconsistedofacetonitrile-water（gradientelution）attheflow

rateof0.35mL/min.Thedetectionwavelengthwassetat219nm，andthecolumntemperaturewas

35℃.Thesamplesizewas1μL.Usingvaccarinasreference，thefingerprintsofVaccariaeSemen

crudeproductanditsprocessedproduct（eachof17batches，S1-S17，CS18-CS34）weredrawn.

ThesimilarityevaluationandcommonpeakidentificationwerecarriedoutbySimilarityEvaluation

SystemofTCMChromatographicFingerprint（2012edition）;clusteranalysis，principle

compon