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1.ROS的来源：

2.一般有两个来源：mitochondria和NADPHoxidase

3.还有如吞噬体(Phagosome)和对D-氨基酸氧化也可以产生ORS。

还有peroxisomes,cytochromeP-450和其他的细胞物质

4.ROS的阻断剂：

5.最常用的是NAC、catalase

6.应用NAC预处理即可在一定程度上清除刺激因素导致的细胞生成的ROS

7.在培养中加入catalase即可降低ROS水平。

另外作为ROS的inhibitor，比较常用的还有DPI(可以针对NADPHoxidase来源

的ROS)。

3.ROS在信号通路中的作用：

ROS可以有利于细胞生长、干细胞繁殖、神经保护等；

ROS浓度过高也可以导致细胞凋亡等问题。

ROS在生理状态下的作用的是：宿主自身防御，蛋白质转录后修饰，引导细胞内信号

通路产生，调节基因表达，细胞分化和生长，还原金属离子，调节基质中的金属蛋白酶，

蛋白质和生物合成的交联，细胞还原电位的调节和一氧化氮系统的交联等。

ROS在病理状态下的作用就很多了，像楼主说的细胞凋亡啦，血管新生啦，炎性啊，

增殖啦什么的。

首先NAC是半胱氨酸，即是还原型谷胱甘肽(GSH)的前体，又是ROS的直接清除

剂(invitro)，能够清除H2O2，OH和HOCl等。它所具有的抗氧化作用，在清除ROS

前需要反应时间，必须在给予产生ROS刺激剂之前培养

从作用范围来说的话，在相同剂量的前提下，NAC对ROS的抑制作用强于DPI(因

为NAC可以间接的产生抗氧化剂GSH，也可以直接作为抗氧化剂来清除ROS；但DPI

更主要的是针对NADPHoxidase来源的ROS，可是不能完全证明NADPHoxidase来源

的ROS，这个时候建议同时使用NADPHoxidaseinhibitorapocynin证明效果更佳，前

提是有足够的实验经费的话)

如果给予不同的剂量的话，那就另当别论了。

对的，如果要做ROS的实验的话，肯定是要加一种或者多种ROS抑制剂来说明ROS

的产生以及ROS的产生源是什么。

要是楼主可以肯定样品的ROS主要是来源于NADPHoxidase的话，可以加ROS

inhibitor；但是无法确定ROS来源的情况下，还是建议楼主加做个NAC。

的确这个是很复杂的问题。首先ROS的来源有很多种，ROS的抑制剂又有很多种。

要详细的明确的分开每个来源的话，还是很发杂的。

这里就先说说2个主要来源的区分吧(mitochondrialandNADPHoxidase)

首先线粒体。

当线粒体产生过量的ROS的时候，线粒体本身的正常结构和物理状态都发生了变化。

比如说线粒体膜的完整性和膜电位的缺失。这都可以用来评价ROS是否来源于线粒体。

那么一般情况下，在测量ROSproduction(一般用H2DCFDA等标记ROS的物质

标记后测相应的波长即可)的基础上，再测量线粒体膜电位的变化和膜的变化(可以用

cationicJC-1标记线粒体膜反应膜电位的变化以及用流式细胞来调查膜变化)。如果都发

生变化时，则可以说明ROS是来自于mitochondrial。一般的情况下，有的审稿人可能会

要求找个抑制剂来巩固时，可以是用线粒体内antioxidantSOD