《基因工程制药技术》课件.pptVIP

*****************课程概述课程内容本课程深入探讨基因工程在制药领域的应用,包括DNA结构、基因表达、重组DNA技术等核心技术。实践培养通过案例分析和实验操作,培养学生在基因工程药物研发中的实践能力。未来趋势展望基因工程制药技术的发展方向,了解其在医药行业中的重要地位。基因工程简介基因工程是一种利用分子生物学技术改变生物体遗传特性的方法。它通过对DNA分子进行人工操作和重组,从而获得所需的生物活性物质或改变生物的特性。这种技术在医药、农业等领域广泛应用,为人类社会的发展做出了重要贡献。DNA分子结构DNA是一种复杂的生物大分子,由两条螺旋状的核糖核酸链组成。这种独特的双链结构使DNA能够稳定地存储遗传信息,并可以通过复制和转录的过程进行传递和表达。DNA的核心结构包括碱基、五碳糖和磷酸基团,它们以特定的顺序排列,构成了遗传密码。基因的复制和转录1DNA复制DNA分子通过复制过程能高度精确地复制自身,确保遗传信息的传递。2RNA转录DNA上的遗传信息通过转录过程被复制到RNA分子上,为蛋白质合成提供模板。3精确调控这些精密的分子机制受到严格的调控,确保遗传信息的准确性和稳定性。基因的翻译过程1mRNA合成DNA序列信息转录为mRNA分子2tRNA识别mRNA序列被tRNA分子识别3氨基酸连接tRNA催化氨基酸连接生成多肽链4蛋白质折叠多肽链逐步折叠形成功能性蛋白质基因的翻译过程是指将遗传信息从DNA转录到mRNA,再由mRNA指导氨基酸按照特定顺序连接,最终形成正确折叠的功能性蛋白质的过程。这是基因表达的核心步骤之一,确保了遗传信息能够被正确地表达为有意义的生物分子。重组DNA技术基因剪切利用限制性内切酶可以将目标基因从生物体中切割下来,这是重组DNA技术的关键。质粒载体DNA片段可以插入到环状质粒载体中,利用质粒的自我复制能力进行扩增。转基因生物将重组DNA导入宿主细胞,可以使其表达外源基因,制造出转基因生物。克隆技术利用重组DNA技术可以大量复制感兴趣的基因序列,为后续研究和应用奠定基础。酶促反应酶蛋白分子结构酶是由特定的氨基酸组成的大分子蛋白质,具有高度专一性的催化功能。酶表面有特殊的活性位点,能与底物分子结合并降低反应的活化能。酶与底物结合酶与底物分子之间通过氢键、离子键等作用力结合,形成酶-底物复合物。这种特异性结合有助于促进化学反应的进行。酶催化反应酶在反应过程中不发生消耗或破坏,而是通过降低反应的活化能来加速反应的进行。这种催化作用大幅提高了反应的速率和效率。基因克隆技术快速增殖基因克隆技术可以在短时间内大量复制目标DNA序列,从而获得大量所需的基因.准确复制利用DNA聚合酶等酶类可以高度复制原始DNA,确保克隆基因的结构和功能与原基因完全一致.广泛应用该技术广泛应用于基因工程、DNA测序、基因诊断和治疗等领域,是现代生物技术的基础.关键步骤主要包括DNA提取、酶切、连接、细胞转化等关键步骤,需要精细的实验操作.基因重组技术1DNA片段连接利用限制酶将目标基因DNA切割出来,再用DNA连接酶将其与载体DNA连接起来。2基因导入宿主细胞将重组DNA分子导入大肠杆菌等宿主细胞,利用宿主细胞的细胞过程来表达目标基因。3筛选阳性克隆体对转化后的细胞进行抗性筛选和功能检测,找出成功导入目标基因的阳性克隆体。4扩增和表达目标基因培养阳性克隆体,大规模表达出目标蛋白质,为进一步应用奠定基础。细胞培养技术细胞株培养从动物或植物中分离获得的细胞株,通过特殊培养条件维持和增殖,用于生产各种生物制品。生物反应器使用特制的生物反应器,大规模培养细胞,以高效率生产所需的蛋白质或其他生化产品。无菌操作严格的无菌操作环境和无菌技术,确保细胞培养过程中免受微生物污染。蛋白质表达系统大肠杆菌表达系统利用大肠杆菌高效快速进行大量蛋白质表达是最常见的方法。大肠杆菌表达系统简单、成本低、易操作。但对于一些大分子蛋白存在局限性。酵母菌表达系统酵母菌表达系统能进行蛋白质的翻译后修饰,所产生的蛋白质更接近天然状态。表达量一般低于大肠杆菌,但适合表达更复杂的蛋白质。哺乳动物细胞表达系统利用哺乳动物细胞进行基因工程蛋白表达,能够更好地进行蛋白质的正确折叠和翻译后修饰,适用于更复杂的蛋白质。但表达效率相对较低。重组蛋白质纯化细胞破碎将表达了重组蛋白的细胞或组织机械或化学破碎,释放出目标蛋白。蛋白质分离利用离心、层析等方法将目标蛋白从其他细胞成分中分离出来。亲和层析利用目标蛋白与特定亲和基团的高度特异性结合,实现高度纯化。蛋白质浓缩采