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灵芝成分灭菌方法研究.pdfVIP

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以家为家,以乡为乡,以国为国,以天下为天下。——《管子》

不同灭菌方法对灵芝成分的影响

摘要:目的:建立灵芝质量可靠且经济的灭菌方法。方法:采用热压灭菌、微波灭菌、紫外

线灭菌、干热灭菌和环氧乙烷气体灭菌方法对同一批灵芝灭菌,采用高效液相色谱法测定不

同灭菌方法对灵芝中灵芝多糖含量的影响。结果:环氧乙烷灭菌法可作为灵芝可靠且经济的

灭菌方法。

引言

灵芝为灵芝科(Ganodermatacea

e)真菌赤Ganodermalucidum(W.Curt.Fr.)Karst的干燥子实体。灵芝一般生长在湿度高且光

线昏暗的山林中,主要生长在腐树或是其树木的根部。灵芝是一种坚硬、多孢子和微带苦

涩的菌类植物,当达到成熟期的灵芝就会喷出粉状的孢子,从而进行繁殖。

灵芝的药理成分非常丰富,其中有效成分可分为十大类,包括灵芝多糖、灵芝多肽、三萜

类、16种氨基酸(其中含有七种人体必需氨基酸)、蛋白质、甾类、甘露醇、香豆精苷、生物

碱、有机酸(主含延胡索酸),以及微量元素Ge、P、Fe、Ca、Mn、Zn等。灵芝对人体具

有双向调节作用,研究表明灵芝具有滋养强壮、调节免疫、抗衰老等多种药理作用,所治病

种,涉及心脑血管、消化、神经、内分泌、呼吸、运动等各个系统,尤其对肿瘤、肝脏病变、

失眠以及衰老的防治作用十分显著。现代药理和临床试验证明,灵芝对多种疾病具有十分显

著的疗效。其中灵芝多糖被认为是灵芝扶正固本的主要有效成分之一。由于灵芝打成药粉

入药时,需要在入药前对灵芝粉进行灭菌并进行微生物限度检查,为考察灭菌方法对灵芝成

分的影响,故采用灵芝多糖作为指标成分,本文采用热压灭菌、微波灭菌、紫外线灭菌、干

热灭菌和环氧乙烷气体灭菌方法对同一批灵芝进行灭菌,采用高效液相色谱法测定了不同灭

菌方法对灵芝中灵芝多糖含量的影响,实验结果如下。

1、实验部分

1.1仪器与试药

Agilent1100高效液相色谱仪(安捷伦科技有限公司),VWD紫外检测器,Agilent化学工作

站。KQ-600B超声波清洗仪,热压灭菌锅,紫外灯。D-无水葡萄糖对照品由中国药品生物

制品检定所提供,批号为110833-20050,硫酸、无水乙醇为分析纯,环氧乙烷。灵芝为我

校食用菌实验室自己培育。

1.2灭菌方法原理

热压灭菌法(autoclavesterilization)利用饱和蒸汽的湿热在一定压力下所释放的潜热杀灭病

原微生物、细菌繁殖体、芽胞和病毒的方法。特点:温度高、穿透力强,效果可靠热力消毒

灭菌法。

微波灭菌法使菌体蛋白受热变性,破坏核酸及酶的活性,特点:穿透力强,简单方便。

紫外线灭菌法利用紫外线,使菌体蛋白质光解变性而死亡。常用紫外线灯管消毒法,最佳

杀菌波长:253.7nm;有效距离:物品:25~60cm,空气:小于2m;照射时间:灯亮5~

7min后开始计算应大于30min;适用:室内空气、物体表面;特点:简单、方便、无损

物品。

干热消毒灭菌法:是利用热力破坏微生物的蛋白质、核酸、酶、细胞壁和细胞膜等,从

而达到灭菌的目的。

环氧乙烷气体消毒使菌体蛋白凝固变性,干扰细胞酶的活性,改变细胞膜通透性,适用于

不宜使用高温消毒、耐湿的物品,特点:穿透力强,毒性大、易燃易爆不宜使用高温消毒、

耐湿的物品。

1.3灵芝粉的制备

取灵芝80~100℃干燥后,于-10~-15℃冰箱冷冻后立即粉碎成80~100目细粉。

以家为家,以乡为乡,以国为国,以天下为天下。——《管子》

1.4不同灭菌方法灵芝粉样品的制备

取灵芝粉,分装在牛皮

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