淀粉合成相关基因SBEⅡb和SSⅢa对水稻抗性淀粉含量影响的分析.pdf

目录

摘要I

AbstractIII

第一章绪论1

1.1引言1

1.2抗性淀粉的定义以及类型1

1.3稻米淀粉类型以及合成途径3

1.4淀粉合成酶的功能3

1.4.1颗粒淀粉合酶3

1.4.2淀粉合酶4

1.4.3淀粉分支酶5

1.4.4淀粉脱支酶5

1.5高抗性淀粉水稻的研究进展6

1.6基因编辑技术7

1.7研究内容及意义8

第二章材料与方法10

2.1实验材料10

2.1.1植物材料10

2.1.2菌株和载体质粒10

2.1.3实验试剂10

2.1.4主要仪器11

2.1.5常用培养基配制11

2.2实验方法13

2.2.1靶点设计13

2.2.2敲除载体的构建14

2.2.3农杆菌介导的水稻遗传转化17

2.2.4水稻叶片DNA提取18

2.2.5阳性植株鉴定19

2.2.6编辑植株鉴定19

2.2.7突变体类型分析20

2.2.8E2代纯合突变体农艺性状观察20

2.2.9突变体粒型统计20

2.2.10突变体扫描电镜观察20

2.2.11突变体直链淀粉含量检测21

2.2.12突变体抗性淀粉含量检测21

2.2.13脂类含量检测22

2.2.14蔗糖含量检测23

2.2.15水稻品质测定23

2.2.16体内血糖变化测定24

第三章结果与分析25

3.1敲除载体的构建25

3.2农杆菌介导的水稻遗传转化26

3.3阳性苗鉴定及编辑率统计26

3.4突变体T-DNAfree植株筛选及基因型鉴定28

3.4.1突变体T-DNAfree植株筛选28

3.4.2突变体基因型鉴定28

3.4.3突变体氨基酸序列预测29

3.5突变体直链淀粉含量检测31

3.6突变体胚乳脂质含量检测31

3.7突变体抗性淀粉含量检测33

3.8突变体农艺性状观察33

3.9突变体籽粒粒型分析35

3.10突变体籽粒透明度和透明率统计36

3.11突变体淀粉颗粒形态分析37

3.12蜡质颜色对抗性淀粉含量的影响38

3.13突变体蔗糖含量及种子萌发情况38

3.13.1突变体胚乳中蔗糖含量38

3.13.2突变体种子萌发情况39

3.14突变体糊化温度及胶稠度40

3.15食用突变体后血糖变化曲线41

第四章结论与讨论42

4.1结果总结42

4.1.1SBEⅡb、SSⅢa基因对植株农艺性状的影响42

4.1.2SBEⅡb、SSⅢa基因对抗性淀粉含量的影响43

4.1.3SBEⅡb、SSⅢa基因对水稻品质的影响44

4.2讨论44

参考文献45

附录55

致谢56

摘要

随着经济水平的提高，人们的生活方式和消费习惯发生了改变。其中，精制谷物食物

的消费比例持续提高，这造成肥胖、糖尿病等疾病的发病率大幅增加，严重威胁人类的身

体健康。研究发现，食用富含抗性淀