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分子实验报告酶切.docx

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    质粒DNA酶切、连接、转化、筛选、鉴定

    试验原理

    重组质粒的构建需要对DNA分子进展切割，并连接到适宜的载体上进展体外重组。限制性核酸内切酶和DNA连接酶的觉察与应用，为重组质粒的构建供给了有力的工具。

    限制性核酸内切酶酶切分别法适于从简洁基因组中分别目的基因。质粒和病毒等DNA分子小的只有几千碱基，大的也不超过几十万碱基，编码的基因较少，获得目的基因的方法也比较简洁。

    DNA连接酶催化两双链DNA片段相邻的5’-磷酸和3’-羟基间形成磷酸二酯键。在分子克隆中最有用的DNA连接酶是来自Ｔ４噬菌体的DNA连接酶：T4DNA连接酶。T4DNA连接酶在分子克隆中主要用于：1、连

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