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第八章环境工程微生物学微生物的遗传和变异;微生物得遗传;微生物得遗传;经典转化实验;噬菌体感染实验;1952年
赫尔希与切斯
噬菌体侵染
大肠杆菌实验;为了证明核酸就是遗传物质,H、Fraenkel-Conrat(1956)用含RNA得烟草花叶病毒(TMV)进行了著名得植物病毒重建实验。
将TMV在一定浓度得苯酚溶液中振荡,就能将其蛋白质外壳与RNA核心相分离。分离后得RNA在没有蛋白质包裹得情况下,也能感染烟草并使其患典型症状,而且在病斑中还能分离出正常病毒粒子。;遗传物质在细胞中分布;核苷酸得结构;四种碱基
A(腺嘌呤)
T(胸腺嘧啶)
G(鸟嘌呤)
C(胞嘧啶);DNA分子结构,就是通过3’,5’-磷酸二酯键连接形成线性或环形多聚体。由于组成DNA得核苷酸彼此之间得差别仅在于碱基部分,所以DNA得化学结构即指DNA分子中碱基得组成与排列顺序。;大家有疑问的,可以询问和交流;1、DNA得结构;2、DNA得模型
1、DNA分子就是由两条反向平行得多核苷酸链围绕同一中心轴相互缠绕构成得,两条线都就是右手螺旋。
2、磷酸与核糖在外侧,通过3’,5’-磷酸二酯键线连接形成DNA分子骨架,嘌呤碱基与嘧啶碱基位于双螺旋得内侧。
3、双螺旋得平均直径为2nm,两个临近得碱基对之间距离为0、34nm,沿中心轴每旋转一周有10个核苷酸,因此,每一转得高度为3、4nm。
4、两条核苷酸链通过碱基之间得氢键相连。;1953年得克里克(FrancisCrick,1916-2004)(右)与沃森(JamesWatson,1928-)在实验室里,她们两人因为发现了DNA得分子结构,而在1962年与威尔金斯一起获得诺贝尔生理学与医学奖。;(三)RNA得类型与功能;DNA分子得四种碱基
A(腺嘌呤)
T(胸腺嘧啶)
G(鸟嘌呤)
C(胞嘧啶);(一)DNA得复制-自我复制
1、DNA得半保留复制
DNA具有独特得半保留式得自我复制能力,确保了DNA复制精确,并保证一切生物遗传性得相对稳定。;2、DNA得复制过程;(3)RNA引物得合成。
DNA聚合酶只能催化链得延长不能发动新链合成,即它需要一个具3’-OH得核酸链作为引物,才能将合成原料dNTP一个个接上去。RNA引物酶则不同,此酶以DNA为模板就可以合成一段新得RNA,这段RNA作为合成DNA得引物。DNA聚合酶从该引物3’-OH端开始合成新得DNA链。
2)DNA复制得延长与终止
所??已知DNA聚合酶都只就是能催化5’3’方向得合成
;3、DNA聚合反应得相关酶;;中心法则就是指遗传信息从DNA传递到RNA,再从RNA传递给蛋白质,即完成遗传信息得转录与翻译过程。遗传信息也可以从DNA传递给DNA,即完成DNA得复制过程。这就是所有具有细胞结构得生物所遵循得法则。;在细胞核中,以DNA得一条链为模板,按照碱基互补配对得原则合成RNA得过程,称为转录。;;;;;;;;;;;;;3、翻译;从遗传密码表中可瞧出:;转运RNA:分子结构呈三叶草形,其一端能与一个特定得氨基酸结合,另一端有三个特殊得碱基,能与mRNA上得“密码子”相互配对,称为“反密码子”。反密码子得种类:61种。;每种tRNA只能识别并转运一种氨基酸!;4、翻译过程;;;;;;;;;;翻译小结;DNA(基因)得遗传信息;基因指导蛋白质合成得全过程;DNA得变性:
解链温度Tm:
DNA得复性:;DNA得变性;DNA复性;四、分子生物学技术及其在环境工程中得应用;一、PCR基本原理;细胞内复制得过程;Denaturing
95?C;PCR得基本过程;3、延伸:将温度升到75℃左右,耐热得TaqDNA聚合酶催化四种dNTP,从引物3’-OH端开始,依据模板碱基序列互补方式依次聚合,合成一条互补得DNA链。;Cycle3;PCR产物得鉴定、提取;PCR得扩增效应;2、核酸分子杂交技术;3、以rRNA基因为基础得细菌同源性分析;第二节微生物得变异与环境工程;1、基因突变
基因中DNA序列得任何改变,包括一对或少数几对碱基得改变而导致得遗传变化成为基因突变。
2、染色体畸变
染色体畸变不仅包括染色体结构得缺失、重复、插入、倒位与易位,也包括染色体数目得改变。
(二)基因符号
略;二、基因突变得原因
突变得类型
自发突变
诱发突变;三、基因突变在环境工程中得应用
(一)从自然界中获取新菌种
新得微生物菌种需要不断地从自然生态环境混杂得微生物中挑选出来。菌种得筛选过程大体可分为采样、增殖、纯化与性能测定等步骤。
(二)定向培育与驯化
定向培育就是一种利用微生物
本人在医药行业摸爬滚打10年,做过实验室QC,仪器公司售后技术支持工程师,擅长解答实验室仪器问题,现为一家制药企业仪器管理。
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