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目录
摘要I
AbstractIII
第一章绪论1
1.1胞苷脱氨酶1
1.1.1胞苷脱氨酶的简述1
1.1.2胞苷脱氨酶的检测意义2
1.1.3胞苷脱氨酶的检测方法3
1.2端粒酶7
1.2.1端粒和端粒酶的简述7
1.2.2端粒酶的检测意义8
1.2.3端粒酶的检测方法9
1.3荧光信号放大技术15
1.4生物传感器16
1.5本论文的研究内容18
第二章酶促DNA修复扩增驱动的金纳米粒子生物传感器用于癌细胞中胞苷脱氨酶活性的
单分子检测20
2.1引言20
2.2实验部分21
2.2.1试剂、仪器和核苷酸序列21
2.2.2AuNPs-信号探针偶联物的制备23
2.2.3紫外-可见吸收光谱测量23
2.2.4单个AuNPs上的信号探针数量的测定23
2.2.5AuNPs-信号探针偶联物对盐诱导聚集稳定性的测定24
2.2.6A3A活性测定24
2.2.7荧光光谱测量24
2.2.8凝胶电泳分析24
2.2.9单分子检测25
2.2.10动力学测量25
2.2.11抑制剂分析25
2.2.12细胞培养和细胞提取物的制备25
2.2.13回收率测定26
2.3结果与讨论26
2.3.1A3A的检测原理26
2.3.2可行性验证29
2.3.3单分子成像33
2.3.4实验条件优化34
2.3.5灵敏度分析36
2.3.6特异性分析38
2.3.7动力学测量39
2.3.8抑制剂分析39
2.3.9实际样品分析40
2.4本章小结42
第三章靶标驱动的DNA纳米结构自组装用于活细胞中端粒酶的一步成像43
3.1引言43
3.2实验部分44
3.2.1试剂、仪器和核苷酸序列44
3.2.2细胞培养和端粒酶提取46
3.2.3端粒酶的体外检测46
3.2.4荧光光谱测量46
3.2.5凝胶电泳分析46
3.2.6抑制剂分析47
3.2.7活细胞中端粒酶的成像47
3.3结果与讨论47
3.3.1端粒酶的检测原理47
3.3.2可行性验证49
3.3.3实验条件优化50
3.3.4灵敏度分析52
3.3.5特异性分析53
3.3.6通用性分析54
3.3.7抑制剂分析56
3.3.8活细胞中端粒酶的成像56
3.4本章小结60
第四章总结61
参考文献62
攻读学位期间发表的学术论文及获奖情况76
致谢77
摘要
癌症是指一系列可能起源于任何器官或组织的疾病，其特征是异常细胞不受控制的生
长。研究表明，许多修饰酶在癌细胞中表达异常，是主要的肿瘤标志物之一。胞苷脱氨酶
的脱氨作用
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