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Waters++600E-2487++高效液相色谱系统操作规程 .pdf

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Waters600E—2487高效液相色谱系统操作规

1.目的

规范Waters高效液相色谱系统的使用和维护。

2。范围

本规程适用于Waters高效液相色谱系统的使用和维护.

3。职责

质检室仪器分析员负责Waters高效液相色谱系统的日常使用和维护。

4.系统组成

本系统由Waters600E多溶剂输送系统(有梯度控制器的高压输液泵)、Waters在线脱气机、Rheodyne7725i

手动进样阀、Waters2487双通道紫外检测器、Millennium32色谱工作站/电脑等组成,另外还包括打印机、

UPS和通风柜等辅助设备。

5。程序

5.1。准备

5.1。1。使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相(应足够;流动相必须用0.45μm滤膜过滤)、

样品和标准溶液(也可在平衡系统时配制),更换合适的色谱柱(柱进出口位置应与流动相流向一致)和定

量环。

5.1。2。通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。

5。2。开机和泵操作

5。2。1.开机

5。2。1.1.接通UPS的电源,依次打开断电保护器、脱气机、600E泵、2487检测器,待检测器自检结束

显示测量状态时,打开打印机、电脑显示器、主机.

5。2.1.2.打开Millennium32软件,按「Login。..」,输入用户名和密码,按「OK」注册进入系统主界面。

在Project档内选择所需的项目,右击『RunSamples』图标,选择色谱系统“600_2487”后打开QuickSet

窗口。

5.2.2。更换溶剂

5。2。2。1.打开600E泵后,转动进口集合管阀手柄(以下简称手柄)至RUN位置;

5.2.2.2。将一塑料烧杯放在参照阀出口管下以收集分流的溶剂,向右打开参照阀(断开柱和进样器);

5。2。2.3.按[Direct]键使其显示直接控制屏幕,设流速为1ml/min(梯度配比阀在0ml/min时不工作);

5.2。2。4。选择欲使用的某一溶剂通道,设其比例为100%,其它为0%;

5。2.2.5.将输液管从原有溶剂瓶中取出,放入一干净的空瓶中;

5.2。2.6.逆时钟转动手柄至DRAW位置,用启动注射器从进口集合管阀的接口抽出约2ml溶剂;

5。2.2。7。再将输液管放入新溶剂瓶内,继续抽吸直到新溶剂出来并无气泡为止;

5.2.2.8.转动手柄至RUN位置,将启动注射器取下并排掉筒内的溶剂。

5.2.2。9.重复5。2。2.4.~5.2.2.8.直至所有即将使用的溶剂更换完毕。

5.2。3.排气泡

5.2。3.1。打开参照阀,换流动相为100%超纯水,设流速为10ml/min(注意:确认参照阀是打开的,否则

可能损坏安装好的柱);

5.2。3。2。转动进口集合管阀手柄至DRAW位置,用启动注射器抽出约10ml水;

5.2。3.3。顺时钟转动手柄至INJ位置,缓慢用力使水通过泵头从参照阀出口管排出(注意不要将气泡注

入泵中);

5.2.3.4.按[Stopflow]屏幕键停泵,关上参照阀.

5.2。3。5。如按以上方法不能排尽气泡,从柱入口处拆下泵出口管,用塑料管连接至塑料烧杯中,设流

速为10ml/min,冲洗2~5min(或更长时间)后停泵,重新接上柱.

5.3。平衡系统(分两种情况进行)

5。3.1。等度模式

5。3。1.1.每次以0.1ml/min的增量加大流速至1ml/min,以超纯水冲洗系统10min.

5。3.1.2.检查管路连接、柱接口及泵头处是否漏液,如漏液应予以排除.

5.3.1。3.观察泵控制屏幕上的压力值,压力波动应在平均值的5~10%以内。如超出此范围,可初步判

断为柱前管路仍有气泡,重复5。2.3。下的步骤。

5。3.1.4。压力波动平稳后,换检验方法规定的流动相比例冲洗系统。在检查基线稳定性前,让最少5~

6倍柱体积的流动相通过系统。

5.3.1.5。在QuickSet窗口下的InstrumentMethod档内选择所需的仪器方法,按「Monitor」(此后泵由

软件控制),观察基线和压力变化。如果冲洗至基线漂移10-3Au/min,噪声为10—4Au数量级,且压力平稳

时,可认为系统已达到平衡状态,可以进样。

5.3。1。6。按「Abort」图标(左上第五个),停止监视基线。

5。3.2.梯度模式

5.

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