高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚注射液有关物质 .pdfVIP

高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚注射液有关物质

【摘要】目的：建立高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚注射液的有关物质。

方法：采用AlltimaC18色谱柱，流动相为0.05mol·L-1醋酸铵溶液-甲醇（85∶

15），检测波长245nm。结果：对乙酰氨基酚与其杂质能完全分离，已知杂质对

氨基酚在2.40～191.84ng线性关系良好（r＝0.9999），平均回收率为99.8％，RSD

＝0.91％（n＝6）。结论：所用方法简便、快速、准确，可用于对乙酰氨基酚注

射液的质量控制。

【关键词】高效液相色谱法；对乙酰氨基酚注射液；有关物质

对乙酰氨基酚注射液为一种常见的解热镇痛药，对氨基酚为对乙酰氨基酚注

射液生产过程中的中间体和储存过程中的水解产物，虽也有解热镇痛作用，但其

毒性较大，应予以控制。现行质量标准未对其有关物质进行控制，为此，我们采

用HPLC法测定对乙酰氨基酚注射液中有关物质[1，2]，方法准确，简便，快速。

1实验部分

1.1仪器与试药：Waters2695系列高效液相色谱仪，Waters2996DAD检测

器；色谱柱为AlltimaC18柱（250mm×4.6mm，5μm）。对氨基酚对照品（中

国药品生物制品检定所提供，批号100802-200501）；对乙酰氨基酚注射液（苏州

长征-欣凯制药有限公司，051116，040914，050627）；甲醇为色谱纯；水为

Millipore-Q超纯水系统制得超纯水；其余试剂均为分析纯。

1.2方法与结果

1.2.1色谱条件与系统适应性试验：色谱柱为AlltimaC18柱（250mm×4.6

mm，5μm），流动相为0.05mol/L醋酸铵溶液-甲醇（85∶15），柱温：35℃，

Waters2996DAD检测器，流速1.0ml/min，取供试品溶液及对照品溶液各10μl

注入液相色谱仪。理论板数按对乙酰氨基酚峰计算应不低于2000，对乙酰氨基

酚峰与对氨基酚峰的分离度应符合要求。

1.2.2测定方法：取本品，加流动相制成每1ml中含1.25mg的溶液作为供

试品溶液（临用新制）；精密量取1ml，置100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，

摇匀，作为对照溶液；另精密称取对氨基酚对照品适量，加流动相溶解并稀释制

成每1ml中含2.5μ的溶液，g作为对照品溶液。照高效液相测定法(中国药典2005

年版二部附录ⅤD)测定，用十八烷基硅烷键和硅胶为填充剂；0.05mol/L醋酸铵

溶液-甲醇（85∶15）为流动相；检测波长为245nm。理论板数按对乙酰氨基酚

峰计算应不低于2000，对乙酰氨基酚峰与对氨基酚峰的分离度应符合要求。精

密量取对照溶液10μl注入液相色谱仪，调节仪器灵敏度，使主成份色谱峰的峰

高约为满量程的10%；再准确量取供试品溶液，对照溶液和对照品溶液各10μl

注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍，按外标法以峰面积计

算（按对乙酰氨基酚标示量计算）。

1.2.3测定波长的选择：本品经破坏实验的样品经二级管阵列检测器测定，

通过等高图分析，在245nm处已知杂质对氨基酚吸收值较大，其余杂质也检出

较多，EP5也采用245nm测定，综上所述本方法选择245nm作为检测波长。

1.2.4专属性考察：精密量取空白辅料溶液，空白溶剂，供试品溶液及对照

溶液各10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。空白辅料溶液，空白溶剂均无干扰。

取本品1ml，置100ml量瓶加流动相稀释至刻度，摇匀，置强光（照射度

为4500±500LX）下照射72小时，作为光解样品；取本品1ml，加入5mol/L的

盐酸溶液5ml，电炉上缓缓加热置沸多次，冷却后用5mol/L氢氧化钠溶液中和

后，转移至100ml量瓶，加流动相稀释至刻度，作为酸解样品；取本品1ml，

加入5mol/L的氢氧化钠溶液5ml，电炉上缓缓加热置沸多次，冷却后用5mol/L

盐酸溶液中和后，转移至100ml量瓶，加流动相稀释至刻度，作为碱解样品；

取本品1ml，加入过氧化氢溶液20ml，在室温放置8小时，转移至100ml量瓶，

加流动相稀释至刻度，作为氧化降解样品；取本品1ml，100℃水浴加热8小时，

冷却后转移至100ml