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高效液相色谱法操作步骤
高效液相色谱法的操作步骤如下:
1.过滤流动相并根据需要选择不同的滤膜。溶剂必须为色谱纯,且溶剂及样品必须过膜(0.45
μm)。超声脱气30分钟以上。
2.用流动相冲洗金属过滤器,然后将过滤器浸入储液罐的流动相中。有一段时间没用或者
换了新的流动相,需要先冲洗泵和进样阀。
3.将储液罐放置在一定的高度,以避免由于搬运和其他操作人员的移动而造成不必要的跌
落。
4.然后按以下顺序依次启动高效液相色谱仪:泵→检测器→高效液相色谱软件→设置软件
参数,如分析时间、检测波长、流速等。
5.启动泵,运行5分钟,主要是为了排除系统中的气泡,结束后关闭所有排气阀。
6.然后按照预先计划的速度,以固定的速率,如1mL/min左右,运行流动相,走基线,直
到基线平稳。
7.基线平稳后,在软件中设置样品的运行参数,如流速和分析时间等。分析时间会因样品、
流速、柱长等因素变化。
8.设计走样方法。
9.在进样和进样后操作的过程中,需要及时调整和监控各项参数。
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