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丹青不知老将至,贫贱于我如浮云。——杜甫
标题:乙型肝炎病毒表面抗原诊断(酶联免疫法)SOP文件版本号:修订号:
文件编号:生效日期:
编制人:审核人:发布部门:质量管理小组
乙型肝炎病毒表面抗原诊断(酶联免疫法)SOP文件
本试剂盒在微孔条上预包被纯化的乙肝表面抗体(HBsAb),配以酶标
记抗体(HBsAb-HRP)及TMB等其它试剂,采用夹心法原理检测人血清
(或血浆)中乙肝表面抗原(HBsAg)。
试剂盒组成:
名称48人份96人份480人份名称48人份96人份480人份
1、包被板条1块1块5块7、底物液A1瓶1瓶1瓶
2、酶标抗体1瓶1瓶1瓶8、底物液B1瓶1瓶1瓶
3、阳性对照1支1支1支9、终止液1瓶1瓶1瓶
4、阴性对照1支1支1支10、封板膜3张3张15张
5、样品稀释液1支1支1支11、自封袋1个1个1个
6、浓缩洗涤液1瓶1瓶1瓶12、说明书1份1份1份
操作步骤:
1.平衡:将试剂盒各组分从盒中取出,平衡至室温(18-25℃),微孔
板开封后,余者即时以自封袋封存。
2.配液:浓缩洗涤液配置前充分摇匀(如有晶体应充分溶解),浓缩洗
涤液和蒸馏水或去离子水按1:19稀释后使用。
3.编号:取所需数量微孔条固定于支架,按序编号。
4.稀释:每孔加入20μl样品稀释液。
丹青不知老将至,贫贱于我如浮云。——杜甫
5.加样:分别在相应孔中加入100μl阴、阳性对照血清或待测样品。
6.温育:置37℃温育60分钟。
7.加酶:分别在每孔中加入酶标记抗体50μl。
8.温育:置37℃温育30分钟。
9.洗涤:用洗涤液充分洗涤5次,洗涤后扣干(每次应保持30-60秒
的浸泡时间)。
10.显色:每孔加底物A、B各50μl,轻拍混匀,37℃暗置30分钟。
11.终止:每孔加入终止液50μl,混匀。
12.测定:用酶标仪单波长450nm或双波长450nm/630nm测定各孔OD
值(用单波长测定时,需用空白对照孔归零),并记录结果。
结果判定:
1、临界值(C.O.)=2.1×阴性对照孔OD平均值(阴性对照OD均值小
于0.05时以0.05计算)。
2、结果判定:
1)样本OD值S/C.O.≥1者为HBsAg阳性;反之,判为HBsAg阴性。
2)阴性对照OD均值0.1或阳性对照OD均值≤0.4时,实验无效,
应重新实验。
注意事项:
1.操作应按说明书严格进行。
2.所有样本、试剂和各种废弃物应按传染物处理。严格防止交叉感染,
严格健全和执
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